Анотація до роботи:

Порт О.В. Адгезивні та колонізаційні властивості клінічно значущих штамів Pseudomonas aeruginosa. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 03.00.07 – мікробіологія. – Інститут мікробіології та імунології ім. І.І.Мечнікова, АМН України. Харків, 2006.

Дисертація присвячена вивченню адгезивної активності клінічно значущих штамів синьогнійної палички, впливу антимікробних препаратів та синьогнійного бактеріофагу на адгезивність Pseudomonas aeruginosa, розробці методів зниження адгезивності.

Встановлено, що препаратами, на сьогодні вельми ефективними при синьогнійній інфекції, слід вважати амікацин, меропенем та іміпенем. Штамам
P.аeruginosa, виділеним від хворих за період спостережень, властивий значно більший ступінь адгезивності, ніж музейним та штамам, які вилучені від сільськогосподарських тварин. Виражена антибіотикорезистентність притаманна штамам з високим ступенем адгезивності.

Створення пролонгованого літичного ефекту бактеріофагу може бути досягнуто завдяки використанню його у суміші 1:1 з бальзамом Євдокимова.

1. Вилучено та всебічно охарактеризовано 276 штамів псевдомонад різного походження, з них: 214 вилучено від хворих хірургічного профілю, що перебували на стаціонарному лікуванні в лікарняних закладах міст Харкова, Луганська та Києва; 18 – з навколишнього середовища вказаних лікувальних закладів; 29 – від хворих на гнійно-запальні захворювання тварин; 4 – з продуктів тваринництва.

2. Загальноприйнятими мікробіологічними та біохімічними методами з масиву вилучених культур 13,04 %. визначено сумнівними щодо приналежності до роду Pseudomonas. За допомогою вивчення складу жирних кислот проведено поглиблену ідентифікацію і уточнено таксономічне положення 36 ізолятів неферментуючих грамнегативних бактерій, як представників цього роду.

3. Означено істотні відмінності за мікробіологічними характеристиками, чутливістю до протимікробних засобів, специфічного та полівалентного бактеріофагів штамів псевдомонад, вилучених з аналогічних екологічних ніш в стаціонарах хірургічного профілю різних географічних зон України. Так, штами мікроорганізмів, ізольовані з післяопераційних та опікових гнійних ран, в переважній більшості мають множинну резистентність до більшості антибактеріальних засобів, які на сьогодні широко застосовуються в клінічній практиці. З арсеналу антибіотиків останніх поколінь вельми активними щодо клінічно значущих ізолятів P.aeruginosa виявились амікацин, меропенем та іміпенем.

4. Досліджено ступінь впливу специфічного та полівалентного синьогнійних бактеріофагів на музейні та клінічні штами P.aeruginosa. Встановлено, що серед культур з декількома детермінантами антибіотикорезистентності, виділених від хворих з опікового відділення, 19,4 % штамів були стійкими до фагів, серед штамів, виділених у хірургічному відділенні, фагостійкими виявились – 16,7 %; в реанімаційному – 5,6 %. За допомогою електронної мікроскопії досліджено поетапно (в залежності від експозиції) процеси дистрофії, деструкції і дегенерації фагочутливих псевдомонад під впливом специфічного синьогнійного фагу.

5. Антагоністична активність клінічних ізолятів P.aeruginosa щодо ідикаторних штамів E.coli j, P.aeruginosa АТСС 9027, P.aeruginosa Habs 02, P.aeruginosa Habs 05 проявилась в межах від 22,2 до 27,8 %.

6. Ступінь адгезивності означено у 102 клінічних штамів псевдомонад. Високоадгезивними (ІАМ > 4,0) виявились 56,9 % культур, середньоадгезивними (ІАМ – 2,5 – 4,0) – 31,4 %, низькоадгезивними (ІАМ – 1,76 – 2,49) – 11,7 %. Музейні індикаторні культури псевдомонад в основному проявили низьку адгезивність (54,5 %), середньоадгезивних серед них було 27,3 %, високоадгезивних і неадгезивних – 17,2 % і 18,2 % відповідно.

7. Доведено кореляцію адгезивної активності, множинної антибіотикорезистентності та чутливості до специфічного бактеріофагу у клінічних та музейних штамів псевдомонад.

8. Порівняльним аналізом плазмідних профілей клінічно значущих ізолятів P.aeruginosa, вилучених від хворих в хірургічних стаціонарах, підтверджено інтенсивне формування госпітальних варіантів псевдомонад, які володіють одночасно високою адгезивністю, полірезістентністю до антибіотиків та стійкістю до бактеріофагу.

9. Пролонговану літичну дію виявлено при обробці інфікованої рани сумішшю бактеріофага та бальзаму Євдокимова в співвідношенні 1:1, ефективність доведено на експериментальній моделі псевдомонозної інфекції.

Практичні рекомендації

1. Для підвищення ефективності лікування ГСІ, обумовлених P.аeruginosa, перспективно застосовувати синьогнійний специфічний або полівалентний бактеріофаги в комплексі з протимікробними препаратами.

2. Пролонгований літичний ефект бактеріофагу при місцевому застосуванні може бути досягнуто при використанні його у суміші 1:1 з бальзамом Євдокимова.

Публікації автора:

1. Порт Е.В. Изучение адгезивных свойств штаммов синегнойной палочки //Вісник Харківського національного університету імені В.Н. Каразіна. – 2004. – № 639. – С. 11–15.

2. Порт О.В. Вивчення впливу антибіотиків і бактеріофага на адгезивну активність клінічних і музейних штамів Pseudomonas aeruginosa // Український медичний альманах. – 2005. – Т. 8, № 2. – С. 180–183.

3. Григоров Ю.Б., Тарабан И.А., Порт Е.В. Микробный «пейзаж» гнойных ран у больных с острым осложненным аппендицитом и чувствительность синегнойной палочки к антимикробным препаратам // Харківська хірургічна школа. – 2004. – № 4(13). – С. 70–73. (Порт О.В. виконала бактеріологічні дослідження, визначила чутливість виділених ізолятів до антибіотиків)

4. Деякі біологічні властивості штамів PSEUDOMONAS SPP., виділених у хворих з гнійно-запальними процесами / Покас О.В., Порт О.В., Колтукова Н.В., Осолодченко Т.П., Холодна Т.В., Кучма І.Ю. // Лабораторна діагностика. – 2005. – № 2 (32). – С. 31–36. (Порт О.В. вилучила штами збудників піоціанозів, дослідила їх біохімічні і біологічні властивості).

5. Бактеріофаги і формування резистентності госпітальних штамів синьогнійної палички / Порт О.В., Покас О.В., Оклей Д.В., Тарабан І.А., Григоров Ю.Б., Бугаков І.Є., Осолодченко Т.П., Колтукова Н.В., Кучма І..Ю., Батрак О.А. // Харківська хірургічна школа. – 2005. – № 2(16). – С. 47–51. (Порт О.В. виконала бактеріологічні дослідження, визначила вплив комерційних препаратів бактеріофагів на клінічно значущі штами P.aeruginosa).

6. Електронно-мікроскопічне вивчення взаємодії синьогнійної палички з бактеріофагом / Порт О.В., Незорова О.Ф., Тарабан І.А., Григоров Ю.Б., Осолодченко Т.П., Кучма І.Ю., Бугаков І.Є., Оклей Д.В. // Харківська хірургічна школа. – 2005. – № 3(18). – С. 53–56. (Порт О.В. визначила чутливість до бактеріофагу виділених культур Pseudomonas aeruginosa, підготувала суміш бактерій з препаратом бактеріофагу до електронної мікроскопії, визначила морфологічні особливості взаємодії синьогнійної палички та синьогнійного бактеріофагу).

7. Плазмидные спектры штаммов Pseudomonas spp., виделенных у больных с гнойно–септическими инфекциями / Порт Е.В., Покас Е.В., Колтукова Н.В., Осолодченко Т.П., Холодная Т.В. // Лабораторна діагностика. – 2005. – № 4 (34). – С. 60–63. (Порт О.В. виділяла хромосомну і позахромосомну ДНК).

8. Проблема синьогнійної інфекції у сучасній ветеринарній і гуманній медицині / Кучма І.Ю., Порт О.В., Новиков С.В., Бочаров О.А. // Експериментальна та клінічна медицина. – 2006. – № 1. – С. 43–47. (Порт О.В. вилучила та мікробіологічно охарактеризувала бактерії роду Pseudomonas)

9. Изучение антибиотикорезистентности штаммов PSEUDOMONAS AERUGINOSA, выделенных от животных и людей. / Доценко В.А., Алексеева Н.В., Волянский Ю.Л., Порт Е.В., Толовина Р.П. // Збірник наукових праць Луганського Національного університету. – 2003. – № 31/43. – С. 189–195. (Порт О.В. визначала чутливість досліджуваних штамів синьогнійної палички до антибіотиків).

10. Внутрибольничные инфекции и роль PSEUDOMONAS AERUGINOSA в их возникновении / Кучма И.Ю., Порт Е.В., Непорада Н.В., Дидык В.С., Мальцева Т.В., Маслянчук О.А. // Анали Мечниківського інституту. – 2003. – № 4–5. – С. 23–25. (Порт О.В. провела епідеміологічні дослідження розповсюдженості псевдомонозу в стаціонарах різного профілю м. Харкова).

11. Аналіз властивостей клінічних ізолятів штамів Pseudomonas aeruginosa / Порт О.В., Кучма І.Ю., Осолодченко Т.П., Мироненко Л.Г. // Методи одержання чистих культур мікроорганізмів та їх довгострокового зберігання в колекціях. Роботи співробітників Музею патогенних для людини мікроорганізмів. – Київ, 2004. – Вип. 3. – С. 64–69. (Порт О.В. вилучила штами псевдомонад і дослідила культуральні і біохімічні властивості та чутливість до антибіотиків).

12. Изготовление и применение вакцинного препарата из местных штаммов условно-патогенной микрофлоры / Волянский Ю.Л., Волянский А.Ю., Осолодченко Т.П., Порт Е.В., Доценко В.А., Новиков С.В. // Збірник наукових праць Луганського Національного аграрного університету. – 2004. – № 35/47. – С. 15–22. (Порт О.В. виконала бактеріологічні дослідження).

13. Чутливість культур PSEUDOMONAS AERUGINOSA до антимікробних препаратів і специфічного бактеріофагу / Порт О.В., Кучма І.Ю., Штикер Л.Г., Доценко В.А., Бондаренко О.В., Новиков С.В., Кравцова В.И., Головина Р.П. // Збірник наукових праць Луганського НАУ. – 2005. – №50/73. – С. 205–216. (Порт О.В. виконала бактеріологічні дослідження, визначала антибіотикорезистентність і чутливість до бактеріофагу виділених культур P.aeruginosa).

14. Опыт применения иммуногенного препарата, изготовленного из условно-патогенной микрофлоры / Доценко В.А., Новиков С.В., Волянский Ю.Л., Волянский А.Ю., Осолодченко Т.П., Порт Е.В., Вовк С.И. // Ветеринарна медицина. Міжвідомчій тематичний науковий збірник. – 2005. – Т.1, № 85. – С. 390–395. (Порт О.В. проводила бактеріологічні дослідження).

15. Сравнительная характеристика степени адгезии штаммов Pseudomonas aeruginosa и антибиотикорезистентности за последние 60 лет / Осолодченко Т.П., Кучма И.Ю., Порт Е.В., Новиков С.В., Холодная Т.В. // Методи одержання чистих культур мікроорганізмів та їх довгострокового зберігання в колекціях. Роботи співробітників Музею патогенних для людини мікроорганізмів. – Київ, 2005. – Вип. 4. – С. 41–45. (Порт О.В. виконала дослідження антибіотикочутливості і адгезивних якостей штамів P.aeruginosa).

16. Видова ідентифікація клінічних ізолятів неферментуючих грамнегативних бактерій та їх антагоністична активність / Колтукова Н.В., Покас О.В., Порт О.В., Осолодченко Т.П. // Методи одержання чистих культур мікроорганізмів та їх довгострокового зберігання в колекціях. Роботи співробітників Музею патогенних для людини мікроорганізмів. – Київ, 2005. – Вип. 4. – С. 64–74. (Порт О.В. виконала бактеріологічні дослідження, визначила ступінь антагоністичної активності клінічних ізолятів).

17. Методика профілактичного і лікувального комбінованого застосування синьогнійного бактеріофагу з бальзамом Євдокимова при гнійно–запальних ускладненнях псевдомонадного генезу / Волянський Ю.Л., Кучма І.Ю., Порт О.В., Осолодченко Т.П., Новиков С.В., Казмірчук В.В., Колтукова Н.В., Покас О.В., Тарабан І.А., Григоров Ю.Б., Оклей Д.В.// Інформаційний листок. - Харків, 2005. №41-2005 (Порт О.В. розробила і апробувала методику сумісного застосування бальзаму Євдокимова і синьогнійного бактеріофагу).

18. Патент 13778 Україна, МПК (2006) А61К31/00, А61М31/00. Спосіб лікування кіст підшлункової залози: Пат. 13778 Україна, МПК (2006) А61К31/00, А61М31/00 Велігоцький М.М., Оклей Д.В., Порт О.В. – № u 2005 10125; Заявл. 27.10.05; Опубл. 17.04.06, Бюл. № 4. – 4 с. (Порт О.В. визначила чутливість до бактеріофагу виділених культур мікроорганізмів).

19. Патент 13829 Україна, МПК (2006) А61В 10/00. Спосіб прогнозування гнійно-некротичних ускладнень кіст підшлункової залози: Пат. 13829 Україна, МПК (2006) А61В 10/00 Велігоцький М.М., Оклей Д.В., Порт О.В. - № u 2005 10344; Заявл. 02.11.05; Опубл. 17.04.06, Бюл. № 4. – 4 с. (Порт О.В. визначила чутливість до бактеріофагу виділених культур мікроорганізмів).

20. Порт Е.В. Роль синегнойной палочки во внутрибольничной инфекции // Медицина третього тисячоліття: Збірник тез міжвузівської конференції молодих вчених (20 січня 2003р.). – Харків, 2003. – С. 161–162.

21. Порт Е.В. Проблемы профилактики и лечения синегнойной инфекции у ожоговых больных // Ліки – людині: сучасні аспекти фармакотерапії: Матеріали науково-практичної конференції (18 березня 2004р.). – Харьков, 2004. – С. 139– 140.

22. Порт Е.В., Кучма И.Ю. Влияние антибактериальных препаратов на адгезивные свойства синегнойной палочки // Досягнення та перспективи розвитку фармацевтичної галузі України: Матеріали VI Національного з’їзду фармацевтів України (28 – 30 вересня 2005р.). - Харків, 2005. – С. 449–450. (Порт О.В. визначила дію різних груп антибактеріальних препаратів на адгезивні властивості P.aeruginosa).

23. Порт О.В., Кучма І.Ю., Толовіна Р.П. Моніторінг антибіотикорезістентності штамів Pseudomonas aeruginosa при гнійно-запальних захворюваннях // Медицина третього тисячоліття: Збірник тез міжвузівської конференції молодих вчених (20 січня 2004р.). – Харків, 2004. – С. 34–35. (Порт О.В. означила чутливість до антибіотиків вилучених штамів Pseudomonas aeruginosa).

24. Современные проблемы синегнойной инфекции / Порт Е.В., Мироненко Л.Г., Осолодченко Т.П., Холодная Т.В., Перетятко Е.Г., Штыкер Л.Г. //Современные проблемы гуманизации и гармонизации управления: Материалы 5-й международной междисциплинарной научно-практической конференции. – Харьков, 2004. – С. 220–221. (Порт О.В. виконала епідеміологічні і бактеріологічні дослідження).

25. Оклей Д.В., Порт Е.В., Ткач С.В. Лечение поздних постнекротических септических осложнений острого деструктивного панкреатита // Матеріали ІІІ науково–практичної конференції молодих вчених інституту загальної та невідкладної хірургії АМН України (1 липня 2005 р.). – Харків, 2005. – С. 57–58. (Порт О.В. виконала бактеріологічні дослідження, приймала участь у лікуванні хворих).

26. Бугаков І.Є., Порт О.В. Застосування препарату бактеріофаг у хірургічній практиці // Від фундаментальних досліджень до медичної практики: Матеріали Всеукраїнської науково-практичної конференції молодих вчених і спеціалістів (26 листопада 2005р.). - Харків, 2005. – С. 20. (Порт О.В. визначила чутливість до бактеріофагу виділених культур P.aeruginosa).

27. Адгезивность, как фактор патогенности псевдомонад, при развитии внутрибольничной инфекции / Порт Е.В., Покас Е.В., Кучма И.Ю., ОсолодченкоТ.П., Мироненко Л.Г., Батрак Е.А., Чупринова С.И., Штыкер Л.Г., Рябова И.С., Завада Н.П., Перетятко Е.Г., Холодная Т.В. // Современные проблемы гуманизации и гармонизации управления: Материалы 6-й международной междисциплинарной научно-практической конференции. – Харьков, 2005. – С. 200–201. (Порт О.В. провела дослідження антибіотикочутливості і адгезивних якостей штамів P.aeruginosa).

28. Антагоністична активність клінічних штамів P.аeruginosa / Порт О.В., Кучма І.Ю., Колтукова Н.В., Покас О.В. // Актуальные вопросы борьбы с инфекционными заболеваниями в гуманной и ветеринарной медицине, посвящённой 160 – летию со дня роджения лауреата Нобелевской премии И.И. Мечникова: Матеріали Міжнародної наукової конференції. – Харків, 2005. - www.imiamn.hutl.ru/journ (Порт О.В. визначила ступінь антагоністичної активності клінічних ізолятів псевдомонад).

29. Зависимость адгезивных свойств Pseudomonas aeruginosa от чувствительности к антимикробным препаратам и синегнойному бактериофагу / Порт Е.В., Кучма И.Ю., Колтукова Н.В., Покас Е.В. // III съезд микробиологов Узбекистана: Тезисы докладов (9 – 10 ноября 2005г.). – Toshkent, 2005. – С. 106–107. (Порт О.В. визначила дію різних груп антибактеріальних препаратів і синьогнійного бактеріофагу на адгезивні властивості P.aeruginosa).

30. Велигоцкий Н.Н., Бугаков И.Е., Порт Е.В. Применение синегнойного бактериофага в хирургической клинике // Современные проблемы терапии хирургических инфекций: Материалы V юбилейной всеармейской международной конференции (16 – 18 ноября 2005г.). Москва, 2005. – С. 21. (Порт О.В. визначила чутливість до бактеріофагу виділених культур Pseudomonas aeruginosa).