Анотація до роботи:

Ващенко Л.М. Антимутагенна і протипухлинна активність Pseudomonas syringae pv. atrofaciens i Pseudomonas syringae pv. coronafaciens. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.07 – мікробіологія. Інститут мікробіології і вірусології ім. Д.К.Заболотного НАН України, Київ, 2004.

Дисертація присвячена вивченню геномоделювальних та протипухлинних властивостей культуральної рідини, клітин та ліпополісахаридів (ЛПС) двох патоварів P. syringae.

В роботі показано, що екстраговані 0,85%-м розчином хлориду натрію ЛПС P. syringae pv. atrofaciens 8281 i P. syringae pv. coronafaciens 9030 мають типовий для бактерій цього виду хімічний склад.

В бактеріальній тест-системі з ауксотрофними за гістидином штамами Salmonella typhimurium встановлено, що P. syringae pv. atrofaciens 8281 i P. syringae pv. coronafaciens 9030 не утворюють сполук із мутагенною активністю у разі культивування на картопляному бульйоні. ЛПС P. syringae pv. atrofaciens 8281 і P. syringae pv. coronafaciens 9030 притаманна антимутагенна активність стосовно спонтанного та індукованого біхроматом калію мутагенезу у тест-штамів S. typhimurium. Антимутагенна активність обох досліджуваних ЛПС найбільшою мірою виявляється за одночасної дії їх з мутагеном на клітини тест-штамів. Це, ймовірно, пов’язано зі здатністю ЛПС адсорбувати біхромат калію.

Сік із листків пшениці у фазі сходів з ознаками ураження P. syringae pv. atrofaciens 8281 та неуражених листків виявляє однакову антимутагенну активність. Отже, в уражених бактеріями рослинах пшениці не утворюються сполуки з мутагенною активністю.

За допомогою моделі пухлиноутворення, спричиненого Agrobacterium tumefaciens на експлантатах картоплі, показано, що фільтрат культуральної рідини, зруйновані ультразвуком клітини та ЛПС патоварів P. syringae запобігають пухлиноутворенню та/або зменшують його інтенсивність.

1. Ліпополісахариди P. syringae pv. atrofaciens 8281 і P. syringae pv. coronafaciens 9030, одержані екстракцією розчином хлориду натрію, мають хімічний склад, властивий бактеріям цього виду.

2. Встановлено, що P. syringae pv. atrofaciens 8281 і P. syringae pv. coronafaciens 9030 за умов культивування на картопляному бульйоні не утворюють екзометаболітів із мутагенною або антимутагенною активністю.

3. Вперше показано, що ліпополісахариди P. syringae pv. atrofaciens 8281 і P. syringae pv. coronafaciens 9030 виявляють антимутагенні властивості, зменшуючи частоту спонтанного та індукованого біхроматом калію мутагенезу у тест-штамів S. typhimurium. Антимутагенна активність ліпополісахаридів P. syringae залежить від їхньої концентрації. Термічне оброблення ЛПС P. syringae pv. atrofaciens 8281 не зменшує його антимутагенну активність. Антимутагенна активність ліпополісахаридів досліджуваних патоварів P. syringae є найвищою за умови одночасного внесення ЛПС і мутагену до суспензії клітини тест-штамів S. typhimurium.

4. Виявлено, що сік із листків пшениці у фазі сходів має антимутагенні властивості. Вперше встановлено, що бактерії P. syringae pv. atrofaciens 8281 не впливають на антимутагенну активність пшениці за її інфікування.

5. Фільтрати культуральних рідин P. syringae pv. coronafaciens 9030 і P. syringae pv. atrofaciens 8281 запобігають пухлиноутворенню, спричиненому A. tumefaciens на експлантатах картоплі, за оброблення експлантатів до інокуляції агробактеріями. Протипухлинну дію культуральних рідин патоварів P. syringae обумовлено термолабільними речовинами, які накопичуються в середовищі під час культивування бактерій. Порівняно з позаклітинними метаболітами на процес пухлиноутворення активніше впливають зруйновані ультразвуком клітини досліджуваних патоварів P. syringae.

6. Встановлено, що ЛПС P. syringae pv. atrofaciens 8281 і P. syringae pv. coronafaciens 9030 притаманна протипухлинна активність щодо пухлин, спричинених A. tumefaciens на експлантатах картоплі. Досліджувані ЛПС виявляють протипухлинну активність за використання їх у період інокуляції експлантатів суспензією клітин A. tumefaciens. Оброблення експлантатів через добу після інокуляції бактеріями є менш ефективним.

Публікації автора:

Матеріали дисертаційної роботи опубліковано в 4 статтях у фахових журналах, 6 матеріалах і тезах конференцій:

1. Ващенко Л.М., Гвоздяк Р.І., Пасічник Л.А. Антимутагенні властивості ліпополісахариду Pseudomonas syringae pv. coronafaciens 9030 // Науковий вісник УжНУ, серія: Біологія. – 2001. – №9. – С. 145 – 147 (Здобувачем особисто вивчено вплив ЛПС P. syringae pv. coronafaciens 9030 на виживання та на спонтанний фон мутацій тест-штамів S. typhimurium).

2. Гвоздяк Р.І., Ващенко Л.М., Пасічник Л.А. Генопротекторна активність ліпополісахариду Pseudomonas syringae pv.coronafaciens 9030 // Доповіді НАНУ. – 2003. – № 4. – С. 159 – 162 (Здобувачем особисто вивчено здатність ЛПС P. syringae pv. coronafaciens 9030 зменшувати мутагенну дію біхромату калію на S.typhimurium).

3. Гвоздяк Р.І., Пасічник Л.А., Ващенко Л.М. Вплив ліпополісахарид-білкового комплексу Pseudomonas syringae pv. atrofaciens на процес пухлиноутворення, спричинений Agrobacterium tumefaciens // Мікробіол. журн. – 2003. – 65, № 3. – С. 5 – 13. (Здобувачем особисто було підібрано штами A. tumefaciens для індукції пухлиноутворення, вивчено взаємодію між P. syringae pv. atrofaciens 8281 та штамами A. tumefaciens, вивчено хімічний склад ЛПС P. syringae pv. atrofaciens 8281, вивчено вплив ЛПС P. syringae pv. atrofaciens 8281 на виживання A. tumefaciens та вплив на пухлиноутворення на експлантатах картоплі, спричинене A. tumefaciens).

4. Ващенко Л.М., Пасічник Л.А., Гвоздяк Р.І. Антимутагенна активність пшениці, інфікованої P. syringae pv. atrofaciens // Науковий вісник Чернівецького університету: Збірник наук. праць. – 2004. – Вип. 194. – С. 42 – 47. (Здобувачем особисто вивчено вплив інфікування P. syringae pv. atrofaciens 8281 на антимутагенну активність спиртового екстракту та соку із листів пшениці у фазі сходів стосовно спонтанного та індукованого біхроматом калію мутагенезу у тест-штамів S. typhimurium).

5. Гвоздяк Р.И., Пасичник Л.А., Ващенко Л.Н. Влияние липополисахарида Pseudomonas syringae pv.coronafaciens 9030 на частоту мутаций Salmonella typhimurium// Международная конференция "Микробиология и биотехнология XXI столетия" (Минск, 22 –24 мая, 2002): Материалы конференции. – Минск, 2002.– С. 128 – 129.

6. Gvozdyak R.I., Vaschenko L.M., Pasichnyk L.A. Antimutagenic activity of Pseudomonas syringae pv. atrofaciens lipopolysaccharide and its influence on tumor formation // 6–th Intern. Conference on Pseudomonas syringae pathovars and related pathogens (Acquafredda di Maratea (PZ), Italy, September 15–19, 2002): Book of abstracts. – 2002. – P. 63.

7. Пасічник Л.А., Ващенко Л.М., Гвоздяк Р.І Біологічна активність ліпополісахариду Pseudomonas syringae pv.coronafaciens 9030 // Укр. біохім. журн.– 2002.– 74, № 4б.– С.165.

8. Ващенко Л. Н. Антимутагенные свойства P. syringae pv. atrofaciens в бактериальной тест–системе // 7–ая Пущинская школа–конференция молодых ученых «Биология наука XXI века» (Пущино, 14 – 18 апреля, 2003): Сборник тезисов. – Пущино, 2003. – С. 267.

9. Vashchenko L. M., Gvozdyak R. I., Pasichnyk L. A. Influence of P. syringae pv. coronafaciens lipopolysaccharide on A. tumefaciens galls on potato discs // I FEMS Congress of European Microbiologist (Ljubljana, June 29 – July 3, 2003): Abstract book. – 2003. – P. 428.

10. Vashchenko L. M. Gene modulation activity of P.syringae pv. atrofaciens UCM B-1013 // Conference for young scientists on molecular biology and genetics (Kyiv, September 25 – 27, 2003): Abstract book. – Kyiv, 2003. – P. 224.