Анотація до роботи:

Конуп Л.О. Бактеріальний некроз і почорніння деревини винограду на півдні України. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за фахом 06.01.11 – фітопатологія. – Національний аграрний університет, Київ, 2007.

Дисертація присвячена вивченню бактеріального некрозу і почорніння деревини винограду, виділенню й ідентифікації збудників цих хвороб, методам діагностики і боротьби з ними. Проведено фітосанітарне обстеження промислових виноградників різних областей півдня України на ураженість бактеріальним некрозом винограду за період з 1995 по 2005 рр., а також почорнінням деревини. Встановлено, що на території Одеської області знайдено рослини, уражені бактеріальним некрозом і почорнінням деревини.

Вперше на Україні виявлений і ідентифікований збудник бактеріального некрозу. Встановлено, що найбільш ураженим збудником бактеріального некрозу були сорту винограду Ранній Магарача, Сухолиманський білий, Мускат таїровський і Молдова. Стійким сортом до збудника бактеріального некрозу виявився підщепний сорт Ріпаріа х Рупестріс 101-14.

Отримана високоспецифічна антисироватка до збудника бактеріального некрозу винограду з титром 1:4096, за допомогою якої можна проводити масове тестування винограду на відсутність збудника бактеріального некрозу винограду.

Вперше на Україні виявлена й ідентифікована за допомогою ПЛР аналізу й електронної мікроскопії фітоплазма, збудник почорніння деревини.

Виявлено й ідентифіковано, що переносником цієї хвороби є цикада Hyalesthes obsoletus.

Розроблено заходи щодо захисту винограду від фітоплазмової інфекції, які включають водну термотерапію виноградної лози і саджанців при 50 С протягом 30 хвилин. Дано рекомендації виробництву по профілактиці бактеріального некрозу винограду і почорніння деревини.

1. Проведено фітосанітарне обстеження виноградників Одеської, Миколаївської, Херсонської областей і АР Крим на наявність бактеріального некрозу і почорніння деревини винограду на загальній площі 696 га.

2. Встановлено, що в Одеській області були виявлені виноградні кущі із симптомами бактеріального некрозу. Найбільш ураженими збудником бактеріального некрозу виявились сорти винограду Ранній Магарача, Сухолиманський білий, Мускат таїровський і Молдова, ураженість яких склала 0,8 %; 0,8 %; 0,8 % і 0,7 % відповідно. Стійким при штучному зараженні виявився підщепний сорт Рипариа х Рупестрис 101-14.

3. Вперше в Україні отримана антисироватка до збудника бактеріального некрозу Xylophilus ampelinus. Оптимізована методика діагностики за допомогою непрямого сендвіч методу ІФА на основі розведення антисироватки антикролячого коньюгату з лужною фосфатазою та встановлення оптимальної концентрації суспензії бактерій, титр антисироватки в непрямому сендвіч методі ІФА склав 1:4096. Тестування 10 тисяч кущів винограду і 3780 саджанців цим методом показало, що 0,9 % кущів і 0,8 % саджанців винограду інфіковано збудником бактеріального некрозу.

4. Встановлено, що одним із джерел розповсюдження збудника бактеріального некрозу в Україні є інтродукований садивний матеріал. Інфікованість виноградних саджанців сортів Рислінг рейнський, Мерло і Каберне Совіньйон з Югославії виявилась: 0,3 %; 0,1 %; 0,16 % відповідно.

5. Вперше в Україні виявлена й ідентифікована фітоплазмова інфекція. Ідентифікація була проведена за допомогою ПЛР-аналізу і дозволила встановити, що збудник відноситься до групи стовбуру, який на винограді викликає захворювання, відоме як почорніння деревини.

6. Оптимізовані умови проведення ПЛР для виявлення збудника почорніння деревини. На відміну від рекомендованої Фаджолі (Австралія) методики ПЛР, кількість проби, внесеної в реакційну суміш, було зменшено до 0,5 мкл, а концентрація магнію збільшена до 3 мМ, що привело до утворення чітких одиничних ампліконів у кожній повторності.

7. В ультратонких зрізах флоеми листя винограду, ураженого почорнінням деревини, виявлені фітоплазмоподібні тіла. У клітинах здорових рослин вони були відсутні. Це є додатковим свідченням того, що збудником почорніння деревини є фітоплазмоподібні організми.

8. На виноградниках і на різнотрав'ї уздовж них виявлена цикада Hyalesthes obsoletus, відома як переносник збудника почорніння деревини. Рекомендації зі знищення бур'янів – резерваторів фітоплазми дозволили попередити поширення захворювання.

Публікації автора:

1. Милкус Б.Н., Картузова В.И., Мулюкина Н.А., Гайдай А.Е., Конуп Л.А. Биотехнологические методы диагностики вирусных болезней и бактериального рака//Виноградарство и виноделие. Сборник научных работ.- К: Аграрная наука, 1997. – С. 32-37.

2. Клечковський Ю.Е., Кульмінська Л.О., Тітова Л.Г., Конуп Л.О. Бактеріальне в’янення – небезпечне карантине захворювання винограду//Захист і карантин рослин.- 2000. – Вип.46. – С. 100-106.

3. Мілкус Б.Н., Конуп Л.О. Вірусні і бактеріальні хвороби винограду на Україні//X з’їзд Товариства мікробіологів України: Тез. доп. 15-17 вересня 2004 р., Одеса, 2004. – С. 257.

4. Милкус Б.Н., Конуп Л.А., Жунько И.Д., Лиманская Н.В. Фитоплазменное заболевание винограда на Украине//“Магарач” Виноградарство и виноделие. – 2004. - №3. – С. 12-14.

5. Кульмінська Л.О., Конуп Л.О. Виявлення та діагностика бактеріального в'янення винограду (Методичні рекомендації). – К: Колобіг, 2005.- 16 с.

6. Кульмінська Л.О., Конуп Л.О. Проведення обстежень на виявлення золотистого пожовтіння винограду (Методичні рекомендації). – К: Колобіг, 2005. – 18 с.

7. Мілкус Б.Н., Конуп Л.О., Жунько І.Д., Ліманська Н.В. Тестування деяких сортів винограду на наявність збудника бактеріального раку і вірусів коротковузля та скручування листя // Мікробіол. журн. – 2005. – Т. 67, № 1. – С. 41– 48.

8. Милкус Б.Н., Конуп Л.А., Лиманская Н.В., Жунько И.Д. Бактериальные заболевания винограда в Украине//Зб. статей учасн. міжнар. наук. конф. “Фітопатогенні бактерії. Фітонцидологія. Алелопатія”. – Київ 4-6 жовтня, 2005 р.- Житомир: Державн. екологічн. університет, 2005. - С. 59-63.

9. Милкус Б.Н., Конуп Л.А., Лиманская Н.В., Жунько И.Д. Бактериальные болезни винограда в Украине//Міжнар. наук. конф. “Фітопатогенні бактерії. Фітонцидологія. Алелопатія”: Тез. доп. 4-6 жовтня 2005 р., Київ, 2005. – С. 24.

10. Милкус Б.Н., Конуп Л.А., Лиманская Н.В., Жунько И.Д. Диагностика бактериальных болезней винограда на Украине//Міжнар. наук. конф. “Мікробні біотехнології”: Тез. доп. 11-15 вересня 2006 р., Одеса, 2006.- С. 18.

11. Конуп Л.О. Почорніння деревини винограду та заходи щодо захисту рослин від цієї хвороби//Науковий Вісник аграрн. університ. Біологія.-2006.- № 102. – С. 76-80.

12. Клечковський Ю.Е., Кульмінська Л.О., Конуп Л.О. Бактеріальне в’янення винограду – нова небезпека для виноградарства України//Матер. міжнар. наук.-практ. конф. “Інтегрований захист рослин. Проблеми та перспективи”. – Київ, 13-16 листопада. – 2006. – С. 131-133.

13. Konup L., Limanskya N., Zhunko I., Milkus B. The production of grapevine certified planting material in Ukraine//14^th IC VG Meeting: Abstracts, Locorotondo, Italy, 12-17^th September, 2003. – Locorotondo.- 2003. – P.164.

14. Milkus B., Konup L. Phytosanitary selection of grapevine in the Ukraine//II Balkan symposium of vitilture and enology, Pleven, 8-10^th September, 2004.- Pleven. – 2004. – P.64-65.