Анотація до роботи:

Ліманська Н.В. Бактеріальний рак винограду (діагностика та поширення на півдні України). – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 06.01.11 – фітопатологія. – Національний аграрний університет, Київ, 2006.

Дисертація присвячена вивченню поширення збудника бактеріального раку на виноградниках півдня України, а також оптимізації методики діагностики захворювання.

Бактеріальний рак винограду поширений на виноградниках півдня України. Зараженість рослин окремих сортів, виявлена напротязі 2002 – 2005 років, становила від 0 до 40 %. На виноградниках, де росте велика кількість кущів, заражених збудником бактеріального раку (40 %), спостерігається високий відсоток зразків ґрунту (47,1 %), що містять пухлинотвірні штами Agrobacterium vitis i A. tumefaciens.

Залежно від ділянки збудник бактеріального раку може не виявлятися у південних чорноземних ґрунтах уже через шість місяців після викорчовування дворічних заражених кущів, або може зберігатися не менш, ніж два роки. Вперше в Україні для виявлення патогенних агробактерій у здерев'янілих пагонах, коренях, пухлинах, пасоці і ґрунті було застосовано оптимізовану методику, засновану на полімеразній ланцюговій реакції. Виявлено, що латентно зараженими збудником бактеріального раку є не тільки звичайний посадковий матеріал, але й клоновий матеріал, в тому числі – імпортований. Для вивчення поширення пухлинотвірних агробактерій у ґрунті виноградника доцільним є тестування зразків, відібраних впродовж декількох сезонів.

1. Бактеріальний рак винограду поширений на виноградниках півдня України, де зараженість кущів окремих сортів, виявлена методом ПЛР, становила від 0 до 40,0 % в залежності від сприйнятливості сорту і походження посадкового матеріалу, що свідчить про необхідність відбору для виробництва посадкового матеріалу винограду у данному регіоні насаджень, вільних від патогенних агробактерій.

2. Для півдня України показана висока (до 47,1 %) інфікованість ґрунту деяких ділянок уражених виноградників патогенними агробактеріями, що вказує на необхідність тестування ґрунту перед закладенням насаджень у дослідженому регіоні.

3. Вперше в Україні метод ПЛР застосовано для діагностики бактеріального раку і запроваджено у систему виробництва високоякісного посадкового матеріалу. Оптимізовані методика діагностики та тест-система на основі методу ПЛР для виявлення збудника бактеріального раку у здерев’янілих пагонах, коренях, пухлинах, пасоці винограду, ґрунті.

4. Визначення патогенності штамів агробактерій, виділених з винограду і ґрунту виноградника на півдні України, методом зараження трьох видів тест-рослин (виноград, томати і морква) у порівнянні з методом ПЛР з використанням праймерів до послідовності ipt дозволяє виявити тільки 70 % штамів, що несуть даний ген патогенності.

5. Діагностику бактеріального раку винограду необхідно проводити на основі ПЛР-аналізу, оскільки кількість латентно інфікованих рослин, виявлена при тестуванні здерев'янілих пагонів та коренів методом ПЛР, була у 1,6 – 6,2 разу вищою за кількість рослин із симптомами захворювання.

6. Для діагностики бактеріального раку винограду необхідно відбирати для аналізу одночасно здерев’янілі пагони, корені та пухлини досліджуваних рослин через те, що агробактерії у рослині розподілені нерівномірно, а в пухлинній тканині збудник виявляється не завжди.

7. Одним з джерел розповсюдження патогенних агробактерій в Україні є імпортований посадковий матеріал, не сертифікований на наявність збудника бактеріального раку, інфікованість якого в латентній формі досягала 13 %.

8. В південному малогумусному чорноземі на півдні України збудник бактеріального раку може не виявлятися вже через 6 місяців після викорчовування заражених кущів винограду, або може зберігатися принаймні протягом двох років. Для вивчення поширення збудника бактеріального раку необхідно тестувати ґрунт ділянки протягом декількох сезонів.

Публікації автора:

1. Лиманская Н.В. Выявление Agrobacterium vitis в почве виноградника // Виноградарство и виноделие: Сб. научн. тр. – Ялта: Изд-во института винограда и вина «Магарач», 2003. – С. 29 – 31. (Здобувачем проведено вилучення штамів збудника, тестування штамів методом ПЛР, зроблено висновки, оформлено статтю).

2. Лиманская Н.В., Жунько И.Д., Конуп Л.А., Милкус Б.Н. Применение полимеразной цепной реакции для диагностики A. vitis // Виноградарство и виноделие. – 2003. - № 6. – С. 14 – 16. (Здобувачем проведено виділення штамів агробактерій, тестування штамів методом ПЛР, зроблено висновки).

3. Ліманська Н.В. Діагностика бактеріального раку винограду методом полімеразної ланцюгової реакції з використанням двох пар праймерів // Вісник Одеського національного університету. – 2004. - Т. 9, № 5. - С. 177 – 182. (Здобувачем проведено виділення штамів агробактерій, тестування штамів методом ПЛР, зроблено висновки, оформлено статтю).

4. Ліманська Н.В. Наявність патогенних штамів Agrobacterium vitis у ґрунті виноградників // Вісник аграрної науки. – 2005. - № 2. – С. 81 – 83. (Здобувачем проведено виділення штамів агробактерій, тестування штамів методом ПЛР, зроблено висновки, оформлено статтю).

5. Лиманская Н.В., Жунько И.Д., Милкус Б.Н., Конуп Л.А. Бактериальный рак на импортных саженцах винограда и в почве на винограднике // Праці міжнар. наук. конф. “Проблеми збереження, відновлення та збагачення біорізноманітності в умовах антропогенно зміненого середовища”. – Дніпропетровськ: Проспект, 2005. – С. 453 – 454.

6. Ліманська Н.В., Жунько І.Д., Мілкус Б.Н., Конуп Л.О. Виявлення ipt-позитивних штамів агробактерій у тканинах винограду методом ПЛР // Вісник Одеського національного університету. – 2005. - Т. 10, № 3. - С. 143 – 147. (Здобувачем проведено виділення штамів агробактерій, тестування штамів методом ПЛР, зараження тест-рослин штамами патогенних агробактерій, зроблено висновки, оформлено статтю).

7. Мілкус Б.Н., Конуп Л.О., Ліманська Н.В., Жунько І.Д. Діагностика вірусів і збудника бактеріального раку винограду за допомогою полімеразної ланцюгової реакції // Тези Х З'їзду Товариства мікробіологів України. – Одеса: “Астропринт”, 2004. – С. 286.

8. Мілкус Б.Н., Конуп Л.О., Жунько І.Д., Ліманська Н.В. Тестування деяких сортів винограду на наявність збудника бактеріального раку і вірусів коротковузля та скручування листя // Мікробіол. журн. – 2005. – Т. 67, № 1. – С. 41 – 48. (Здобувачем проведено виділення штамів агробактерій, тестування штамів методом ПЛР, зроблено висновки, оформлено статтю).

9. Мілкус Б.Н., Конуп Л.О., Ліманська Н.В., Жунько І.Д. Бактериальные заболевания винограда в Украине // Зб. статей учасн. міжнар. наук. конф. “Фітопатогенні бактерії. Фітонцидологія. Алелопатія”. – Житомир: Державн. екологічн. університет, 2005. – С. 59 – 63.

10. Konup L., Limanskaya N., Zhunko I., Milkus B. The production of grapevine certified planting material in the Ukraine // Proc. 14^th ICVG Conf. – Locorotondo (Italy), 2003. – P. 164.