Анотація до роботи:

Копаниця Л.В. Біологічні властивості поліовірусів, поширених на території України. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата медичних наук за спеціальністю 03.00.06 – Вірусологія. - Національний медичний університет імені О. О. Богомольця, Київ, 2003.

У дисертації надано докладні відомості про біологічні властивості та циркуляцію польових ізолятів поліовірусів, що були виділені на території України в 1994-1999 роках. Проведені типування та внутрішньотипова диференціація ізольованих штамів продемонстрували циркуляцію вакциноподібних, диких та проміжних штамів (із DR-фенотипом) усіх трьох серотипів в Україні. За результатами реакції віруснейтралізації з моноклональними антитілами найбільша кількість антигенно змінених штамів спостерігалася у випадку поліовірусів 2 типу. Визначено переважні бентонітові варіанти ізолятів різного походження та запропоновано методику кластерного аналізу виділених штамів з метою з`ясування антигенної спорідненості. Продемонстрована можливість застосування бентонітового тесту для внутрішньотипової диференціації польових ізолятів поліовірусів 1 типу.

Дана комплексна оцінка біологічних властивостей 237 штамів поліовірусів, поширених на території України в 1994-1999 роках, визначено їх типовий та внутрішньотиповий склад, антигенна спорідненість за допомогою реакції віруснейтралізації з поліклональними та моноклональними антитілами, бентонітового тесту та кластерного аналізу. Це дозволило оформити колекцію поліовірусів у складі музею вірусів кафедри мікробіології, вірусології та імунології НМУ імені О.О. Богомольця та депонувати всі наявні дикі штами поліовірусів у Регіональній референс-лабораторії ВООЗ з поліомієліту (м. Москва, РФ).

1. Визначено типовий склад 237 штамів поліовірусів вакцинного та дикого походження, що циркулювали на території України в 1994-1999 роках: найчастіше виявлялись поліовіруси 1 типу (41,4 %), поліовіруси 2 типу зустрічались у 35,0 %, поліовіруси 3 типу - у 23,6 % випадків.

2. Встановлена наявність вакциноподібних (65,0 %), диких (31,6 %) та проміжних (3,4 %) штамів серед поліовірусів усіх трьох типів. Однак, розподіл штамів серед кожного з типів був нерівномірним. Так, серед поліовірусів 1 та 3 типів переважали вакциноподібні штами (67,4 % та 89,3 % відповідно). Поліовіруси з характеристикою диких незначно домінували серед поліовірусів 2 типу (49,4 %). Серед поліовірусів 1 та 3 типів дикі поліовіруси складали лише 30,6 % та 7,1 %, відповідно. Проміжні штами в усіх типах зустрічалися з найменшою частотою (2 – 4,8 %). Доведена висока достовірність внутрішньотипової диференціації поліовірусів, про що свідчить збіг результатів досліджень з використанням різних методів: реакції віруснейтралізації з моноклональними антитілами, імуноферментного аналізу з крос-адсорбованими сироватками та полімеразної ланцюгової реакції.

3. Виявлено епітопні відмінності серед внутрішньотипових груп поліовірусів різних типів. За результатами реакції віруснейтралізації найбільша кількість антигенно змінених штамів спостерігалася у випадку поліовірусів 2 типу (55,4%). У вакциноподібних штамів поліовірусів 1, 2 і 3 типів зміни, головним чином, відбувалися в епітопах, що опосередковували взаємодію з моноклональними антитілами АН8 (1 тип), 1Н11 і 8В11 (2 тип) і 9В5 (3 тип). Змінені штами дикого походження виявляли чутливість до моноклональних антитіл, специфічних до вакцинного штаму: 1₀ (1 тип), 4G11 і, рідше, до антитіл 1Н11, 1D11 і 8В11 (2 тип), 9В5 (3 тип).

4. Рекомендовано застосування доступного й економічного бентонітового тесту для внутрішньотипової диференціації поліовірусів 1 типу. Проведені дослідження на матеріалі колекції штамів поліовірусів показали, що основна частина польових ізолятів 1 типу вакцинного походження має характеристику А_бент+ (84,9 %). Штами 1 типу з характеристиками диких цілком представлені варіантом А_бент- (100 %). Серед штамів 2 та 3 типів подібної залежності між походженням вірусів та їх бентонітовим варіантом виявлено не було.

5. Доведена ефективність застосування кластерного аналізу ізольованих штамів поліовірусів шляхом використання кількісних ознак реакції віруснейтралізації з моноклональними антитілами та бентонітового тесту, на підставі якого були виділені групи споріднених поліовірусів серед вакциноподібних і серед диких штамів певного типу. Це дозволяє використовувати такий методичний підхід для внутрішньотипової систематики поліовірусів на підставі їх антигенних властивостей та отримання інформації про джерело та шляхи розповсюдження поліовірусів.

Публікації автора:

Статті:

1. Широбоков В.П., Ніколаєнко І.В., Копаниця Л.В., Сологуб В.К., Іванова О.Є. Панель моноклональних антитіл для внутрішньотипової диференціації поліовірусів ІІ типу // Мікробіологічний журнал. – 1997. – т. 59, № 6. – С. 27-36.

Здобувачем вивчено перехресну активність шести оригінальних антитіл та досліджено їх віруснейтралізуючу активність із польовими ізолятами поліовірусів ІІ типу.

2. Широбоков В.П., Копаница Л.В., Николаенко И.В., Липатникова К.И., Сологуб В.К. Моноклональные антитела, способные дифференцировать штаммы полиовирусов I и III типов // Мікробіологічний журнал. – 2001. – т. 63, № 6. – С. 42-52.

Здобувачем було визначено зону (розведення) оптимальної диференціації дикого й вакцинного штамів 1 типу для двох антитіл, вивчено перехресну активність всіх застосованих антитіл та досліджено їх віруснейтралізуючу активність із польовими ізолятами поліовірусів I та IІІ типу. Здобувач брала участь у статистичній обробці результатів та самостійно підготувала працю до публікації.

3. Широбоков В.П., Задорожная В.И., Липатникова К.И., Бондаренко В.И., Корнюшенко О.Н., Шилов М.В., Николаенко И.В., Мороз Л.В., Копаница Л.В. Украина в программе ВОЗ по ликвидации полиомиелита в мире // Вісник СумДУ. – 2001. – т. 11, № 32. – С. 16-41.

Здобувачем самостійно проведено накопичення вірусовмісного матеріалу, вивчення типового складу та внутрішньотипова диференціація 104 польових ізолятів поліовірусів.

4. Копаниця Л.В., Широбоков В.П., Гордєєва Л.К. Застосування бентонітового тесту для внутрішньотипової диференціації поліовірусів // Лабораторна діагностика. – 2001. - № 3. – С. 31-36.

Здобувачем проведено накопичення вірусовмісного матеріалу, вивчення типового складу 155 та внутрішньотипова диференціація 198 штамів поліовірусів. Здобувачем було вивчено сорбцію диких і вакцинних референс-штамів трьох серотипів поліовірусів на бентоніті в діапазоні значень рН від 3 до 11 і проаналізовано властивості 220 польових ізолятів поліовірусів у бентонітовому тесті. Здобувачем повністю виконано статистичну обробку результатів та самостійно підготовано працю до публікації.

5. Широбоков В.П., Задорожна В.І., Ліпатнікова К.І., Копаниця Л.В., Ніколаєнко І.В., Бондаренко В.І. Ентеровірусні інфекції в Україні та методи їх етіологічної діагностики // Проблемы медицины. – 1998. – т. 3, № 3. – С. 16-20.

Здобувачем проведено порівняльний аналіз методів внутрішньотипової диференціації поліовірусів.

6. Копаниця Л.В., Задорожна В.І., Ліпатнікова К.І., Ніколаєнко І.В., Бондаренко В.І., Шилов М.В. Циркуляція ентеровірусів на території України за умов масової імунізації оральною поліомієлітною вакциною // Актуальні питання медичної мікробіології та вірусології (до 100-річчя від дня народження С.С. Дяченка). – Київ: НМУ ім. О.О. Богомольця. – 1998. – С. 103-105.

Здобувачем проведено накопичення вірусовмісного матеріалу, вивчення типового складу 66 та внутрішньотипова диференціація 38 штамів поліовірусів. Проведено порівняльний аналіз власних даних реакції віруснейтралізації з результатами імуноферментного аналізу та полімеразної ланцюгової реакції.

Патент:

1. Спосіб диференціації поліовірусів І типу: Пат. 39693 А України, МПК 7 C12N7/00, G01N33/84. / Широбоков В.П., Копаниця Л.В. (Україна). – № 2000127425; Заявл. 22.12.2000; Опубл. 15.06.2001. Бюл. пром. власн. № 5., ч. 2 – с. 1.94.

Здобувачем самостійно виконана внутрішньотипова диференціація всіх досліджених штамів поліовірусів 1 типу за допомогою реакції віруснейтралізації з моноклональними антитілами, та проведене дослідження сорбції цих штамів на бентоніті. Здобувачем особисто винайдено кореляцію між значенням редукції інфекційного титру після інкубації з бентонітом та походженням оригінальних польових ізолятів поліовірусів 1 типу. Самостійно оформлено всю документацію для подачі заявки.

Тези доповідей:

1. Задорожная В.И., Копаница Л.В., Широбоков В.П., Липатникова К.И., Николаенко И.В., Гордеева Л.К. Закономерности циркуляции энтеровирусов на территории Украины // Актуальные проблемы медицинской вирусологии (к 90-летию со дня рождения М.П. Чумакова). – М.: Ин-т полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМН. – 1999. – С. 23.

2. Широбоков В.П., Николаенко И.В., Иванова О.Е., Липская Г.Ю., Сологуб В.К., Копаница Л.В., Гордеева Л.К., Липатникова К.И. Оригинальная панель моноклональных антител для внутритиповой дифференциации полиовирусов: сравнение с генетическими методами анализа // Актуальные проблемы медицинской вирусологии (к 90-летию со дня рождения М.П. Чумакова). – М.: Ин-т полиомиелита и вирусных энцефалитов РАМН. – 1999. – С. 53.

3. Kopanitsa L.V., Shirobokov V.P., Gordeyeva L.K., Nikolayenko I.V., Lipatnikova K.I. Variability of vaccine-related poliovirus strains isolated in the Ukraine in 1995-1999 // Proc. V International Forum on Global Vaccinology “Vaccines and Immunization”. – Minsk (Belarus). – 2001. – P. 38.

4. Копаниця Л.В., Гордєєва Л.К. Особливості взаємодії поліовірусів 1 типу з бентонітом // Тези доп. 56-ї наукової конференції студентів та молодих вчених НМУ ім. О.О. Богомольця (присвяченої 160-річчю НМУ ім. О.О. Богомольця), ч. 1. – 2001. – С. 125.