Анотація до роботи:

Юрченко М.Ю. Експресія рецептора CD150 та CD150-опосередковані сигнальні шляхи в нормальних та злоякісно трансформованих В-лімфоцитах. - Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 14.01.07 – Онкологія. – Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України, Київ - 2006.

Дисертацію присвячено дослідженню експресії рецептора CD150 та функціонування CD150-опосередкованих сигнальних шляхів в злоякісних клітинах лімфом, що мають В-клітинне походження.

Встановлено, що CD150 ко-експресований з адапторним білком SH2D1A в злоякісних клітинах лімфом, які мають фенотип активованих В-клітин, а саме лімфоми Ходжкіна (ЛХ) та дифузної крупноклітинної лімфоми з фенотипом активованих В-лімфоцитів (АВК-ДКВЛ). Визначено, що злоякісні клітини класичної лімфоми Ходжкіна експресують на рівні мРНК мембранну та розчинну сплайс-ізоформи CD150 рецептора.

Визначено, що в лініях клітин, що походять з ЛХ, CD150 рецептор та адапторний білок SH2D1A частково ко-локалізовані під поверхневою мембраною, і, в той же час, SH2D1A в основному локалізований в ядрі клітин.

Показано, що CD150 рецептор здійснює регуляцію Akt та МАРК (ERK1/2, JNK2, p38MAPK) сигнальних шляхів в злоякісно трансформованих В-лімфоцитах. Були встановлені мішені фосфорилювання активованої через CD150 рецептор Akt кінази – GSK-3beta та c-Raf кінази. Показано, що регуляція CD150-опосередкованих сигнальних шляхів здійснюється адапторним білком SH2D1A, тирозин кіназами Syk, Lyn та Btk, фосфатазами SHP-2 та SHIP.

В результаті проведеної роботи, було з’ясовано, що СD150-опосередковані сигнальні каскади можуть бути задіяні в регуляції процесів диференціювання, проліферації та апоптозу в нормальних та злоякісно трансформованих В-лімфоцитах.

1. Виявлена ко-експресія CD150 та SH2D1A в злоякісних клітинах лімфом, які мають фенотип активованих В-лімфоцитів, а саме при лімфомі Ходжкіна та при дифузній крупноклітинній лімфомі з фенотипом активованих В-лімфоцитів.

2. Визначено, що злоякісні клітини при лімфомі Ходжкіна та клітинні лінії, що походять з лімфоми Ходжкіна, експресують на рівні мРНК мембранну та розчинну сплайс-ізоформи CD150 рецептора та адапторний білок SH2D1A.

3. Показана ко-локалізація CD150 з адапторним білком SH2D1A в цитоплазмі, а також виявлена ядерна локалізація SH2D1A в злоякісних клітинах лімфоми Ходжкіна.

4. В злоякісно трансформованих В-лімфоцитах CD150 рецептор здійснює регуляцію Akt та МАРК (ERK1/2, JNK2, p38MAPK) сигнальних шляхів, які відіграють важливу роль в контролі процесів проліферації та виживання клітин.

5. Адапторний білок SH2D1A, Syk, Lyn та Btk тирозин кінази, SHP-2 та SHIP фосфатази здійснюють регуляцію CD150-опосередкованих сигнальних каскадів.

6. За допомогою модельної системи виявлені мішені CD150-ініційованих сигнальних каскадів в злоякісних клітинах, а саме GSK-3бета та c-Raf кінази, які пов’язані з процесами малігнізації клітин.

7. Виявлені особливості експресії рецептора CD150 та передачі сигналів через цей рецептор в злоякісно трансформованих В-клітинах можуть бути використані для диференційної діагностики злоякісних лімфом та пошуку нових підходів для терапії хворих на CD150⁺ лімфоми.

Публікації автора:

1. Mikhalap S.V., Shlapatska L.M., Berdova A.G., Yurchenko M.Yu., Clark E.A., Chekhun V.F., Sidorenko S.P. ERK and Akt activation via CD150: signal transduction studies on DT40 cell line model system // Experimental Oncology. – 2002. – V.24, N 1. – P. 13-19. (Дисертант брала участь у підготовці зразків для дослідів, проведенні Вестерн-блот аналізу, аналізі результатів, написанні статті).

2. Yurchenko O.V., Shlapatska L.M., Skryma M.V., Berdova G.G., Kovalevska L.M., Tarasova T.A., Yurchenko M.Y., Kulik G.I., Sidorenko S.P.. Immunohistochemical studies of CD150 expression in some human tumors // Experimental Oncology. – 2003. – V.25, N 3. – P. 186-190. (Дисертант брала участь у визначенні експресії CD150 імуногістохімічним методом в зразках неходжкінських злоякісних лімфом та лімфоми Ходжкіна, аналізі результатів).

3. Sidorenko S.P., Mikhalap S.V., Shlapatska L.M., Yurchenko M.Y., Akimov Y.M., Chekhun V.F. Signal transduction pathways initiated via cell surface receptor CD150: in silico and in vitro analysis // Bioinformatics of Genome Regulation and structure (eds. N.Kolchanov and R.Hofestaedt), Kluver Academic Publishers. – Boston/Dortrecht/London, 2004. – P. 203-210. (Дисертант брала участь у підготовці досліджуваних зразків та проводила Вестерн-блот аналіз, пошук та аналіз літературних даних, приймала участь в аналізі результатів та написанні статті).

4. Mikhalap S.V., Shlapatska L.M., Yurchenko O.V., Yurchenko M.Y., Berdova G.G., Nichols K.E., Clark E.A., Sidorenko S.P. The adaptor protein SH2D1A regulates signaling through CD150 (SLAM) in B cells // Blood. – 2004. – V.104, N 13. – P. 4063-4070. (Дисертант брала участь у проведенні досліджень по визначенню ролі Lyn кінази у фосфорилюванні CD150 рецептора, досліджень CD150-опосередкованих сигнальних шляхів в клітинних лініях, що походять з лімфоми Ходжкіна, та модельній системі DT40, в аналізі результатів та написанні статті).

5. Yurchenko M. Y., Kashuba E. V., Shlapatska L. M., Sivkovich S. A., Sidorenko S. P. The role of CD150-SH2D1A association in CD150 signaling in Hodgkin's lymphoma cell lines // Experimental Oncology. – 2005. – V.27, N 1. – P. 24-30. (Дисертант приймала участь у виконанні всіх досліджень, зробила аналіз отриманих результатів та даних літератури, підготувала статтю до друку).

6. Сидоренко С.П., Міхалап С.В., Юрченко М.Ю., Юрченко О.В., Терлецький Б.М., Ганжа Т.М., Шлапацька Л.М. CD150 рецептор – новий маркер клітин гемопоетичної системи // Український журнал гематології та трансфузіології.- 2005.- Т.5, N.4.- C. 67-69. (Дисертант проводила дослідження CD150-опосередкованих сигнальних шляхів в клітинних лініях, що походять з лімфоми Ходжкіна, приймала участь у обговоренні результатів та написанні статті).

7. Сидоренко С.П., Міхалап С.В., Шлапацька Л.М., Юрченко М.Ю., Чехун В.Ф. Передавання сигналів через CD150 рецептор // Матеріали VIII Українського біохімічного з’їзду / Український біохімічний журнал.- 2002.- Т.74, N.4а (додаток 1).- С. 17.

8. Sidorenko S.P., Mikhalap S.V., Shlapatska L.M., Yurchenko M.Y., Akimov Y.M., Chekhun V.F., Clark E.A. Signal transduction via CD150: switching the pathways // Abstract book. 4th Parnas Conference Molecular Mechanisms of Cell Activation.- Wroclaw, 2002.- P. 20.

9. Yurchenko M.Y., Mikhalap S.V., Sidorenko S.P. The role of tyrosine kinase Lyn in CD150-mediated signaling // Abstract book. 4th Parnas Conference Molecular Mechanisms of Cell Activation.- Wroclaw, 2002.- P. 56.

10. Shlapatska L.M., Lisovsky I.L., Yurchenko O.V., Berdova G.G., Yurchenko M.Y., Chekhun V.F., Sidorenko S.P. CD150 expression in normal and malignant lymphoid cells // Abstract book. 4th Parnas Conference Molecular Mechanisms of Cell Activation.- Wroclaw, 2002.- P. 81.

11. Yurchenko M.Y., Snopok B.A., Berdova G.G., Sidorenko S.P. The role of tyrosine kinase Lyn in CD150 signaling in B lymphocytes // Molecular and Cellular Proteomics.- 2003.- V.2, N.9.- P. 911.

12. Yurchenko M.Y., Mikhalap S.V., Shlapatska L.M., Kashuba E.V., Sidorenko S.P. Lyn control of CD150 signaling in B lymphocytes // Abstract book. Conference for young scientists, PhD students and students on molecular biology and genetics.- Kiev, 2003.- P. 140.

13. Sidorenko S.P., Yurchenko M.Y., Mikhalap S.V., Shlapatska L.M., Yurchenko O.V., Clark E.A. CD150-mediated signal transduction in normal and malignant B lymphocytes // HUPO 2^nd Annual and IUBMB XIX World Congress / Molecular Biology of the Cell.- 2003.- V.14.- P. 282a.

14. Yurchenko M.Y., Shlapatska L.M., Kashuba E.V., Sidorenko S.P. CD150-mediated signaling pathways in Hodgkin’s disease cell lines // 5^th Parnas Conference / Український біохімічний журнал.- 2005.- Т.77, N. 2.- С. 87.

15. Sidorenko S.P., Mikhalap S.V., Shlapatska L.M., Berdova G.G., Yurchenko M.Y., Yurchenko O.V., Terletsky B.M., Clark E.A. The role of CD150 receptor in regulation of B lymphocyte differentiation // 5^th Parnas Conference / Український біохімічний журнал.- 2005.- Т.77, N. 2.- С. 32.