Анотація до роботи:

Клименко Л. Ю. Хіміко-токсикологічне дослідження зопіклону. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата фармацевтичних наук за спеціальністю 15.00.02 – фармацевтична хімія та фармакогнозія. – Національна медична академія післядипломної освіти імені П. Л. Шупика МОЗ України, Київ, 2007.

Дисертацію присвячено хіміко-токсикологічному дослідженню зопіклону.

Розроблено методики ідентифікації зопіклону за допомогою кольорових реакцій, методів УФ-спектроскопії, ТШХ та ВЕРХ, дві тест-системи – для якісного визначення естерів та специфічного визначення зопіклону, методики кількісного визначення зопіклону та його «маркера» – 2-аміно-5-хлорпіридину.

Порівняно ефективність загальних методів ізолювання органічних отрут основного характеру щодо зопіклону та розроблено окремий метод ізолювання зопіклону із біоматеріалу.

Обгрунтовано схему хіміко-токсикологічного аналізу біоматеріалу на зопіклон та доповнення до загальних схем ТШХ-скринінгу органічних отрут, що дозволяють не втратити зопіклон при проведенні неспрямованого дослідження.

1. Вперше на основі систематичних досліджень обгрунтовано схему спрямованого хіміко-токсикологічного аналізу біологічного матеріалу на зопіклон, що включає методики його ізолювання із біологічного матеріалу, ідентифікації за допомогою комплексу кольорових реакцій, методів УФ-спектроскопії, ТШХ та ВЕРХ, а також кількісного визначення. Внесено доповнення до загальних схем ТШХ-скринінгу органічних отрут (пошук невідомої отрути та похідних 1,4-бензодіазепіну), що дозволяють не втратити зопіклон при проведенні неспрямованого дослідження.

2. Визначено умови проведення лужного гідролізу та пергідролізу зопіклону, підтверджено утворення при цьому 2-аміно-5-хлорпіридину, а також сполук з альдегідною та пероксокарбоксильною групами, на основі чого вперше запропоновано високочутливий специфічний комплекс кольорових реакцій на зопіклон та дві тест-системи для якісного визначення речовин, що містять в своїй структурі естерну групу, та специфічного виявлення зопіклону.

3. Розроблено чутливі методики ідентифікації зопіклону за допомогою методів УФ-спектроскопії, ТШХ та ВЕРХ з використанням широко застосовуваного в країнах СНД «ВЕРХ-аналізатора» «Міліхром А-02».

4. За допомогою методів ТШХ, ВЕРХ, УФ-, ЯМР ¹Н-спектроскопії та за температурами плавлення встановлено структуру продуктів, які утворюються при кислотному гідролізі зопіклону в умовах, що застосовуються в аналізі препаратів групи бензодіазепінів. Встановлено, що з кислого гідролізату хлороформом екстрагується (7RS)-6-(5-хлоропіридин-2-іл)-7-гідрокси-6,7-дигідро-5Н-піроло[3,4-b]піразин-5-он, а з нейтралізованого гідролізату – зазначена сполука та 2-аміно-5-хлорпіридин, що можуть бути «маркерами» при виявленні зопіклону в хіміко-токсикологічному аналізі. Запропоновано системи розчинників для розділення зазначених сполук і продуктів кислотного гідролізу препаратів групи бензодіазепінів.

5. Розроблено методики кількісного визначення зопіклону та його «маркера» – 2-аміно-5-хлорпіридину, придатні для цілей хіміко-токсикологічного аналізу (спектрофотометрична, екстракційно-фотометрична та ВЕРХ).

6. Встановлено оптимальні умови екстракції зопіклону та 2-аміно-5-хлорпіридину з водних розчинів. Найбільш високий ступінь екстракції зазначених речовин забезпечують хлороформ та діетиловий етер в лужному середовищі.

7. Вперше порівняно ефективність загальноприйнятих у хіміко-токсикологічному аналізі методів ізолювання органічних отрут основного характеру щодо зопіклону. Розроблено ефективний та експресний індивідуальний метод ізолювання зопіклону із біологічного матеріалу за допомогою хлороформу та запропоновано методики виділення зопіклону з біологічних рідин організму (крові, сечі). Запропоновано методику очищення зопіклону від співекстрактивних речовин в витягах із біологічного матеріалу із застосуванням методу ТШХ.

8. Встановлено розподіл зопіклону в органах отруєних тварин та рекомендовано оптимальні об’єкти для проведення хіміко-токсикологічного аналізу. Встановлено термін зберігання зопіклону в біологічному матеріалі при його гнильному розкладенні.

Публікації автора:

1. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Спектрофотометричне та екстракційно-фотометричне визначення зопіклону та продукту його лужного гідролізу – 2-аміно-5-хлорпіридину // Вісник фармації. – 2004. – №4 (40). – С. 15 – 19. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка статті).

2. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Розробка кольорових реакцій на зопіклон // Журнал органічної та фармацевтичної хімії. – 2005. – Т. 3. – Вип. 1 (9). –
   С. 65 – 69. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка статті).

3. Болотов В. В., Клименко Л. Ю., Іванчук І. М. Застосування тонкошарової хроматографії в аналізі снодійних засобів зопіклону та донормілу // Вісник фармації. – 2005. – №2 (42). – С. 7 – 12. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка статті).

4. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Високоефективна рідинна хроматографія в аналізі зопіклону // Журнал органічної та фармацевтичної хімії. – 2005. –
   Т. 3. – Вип. 4 (12). – С. 77 – 81. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка статті).

5. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Кислотный гидролиз в анализе зопиклона // Актуальні питання фармацевтичної та медичної науки та практики. Збірник наукових статей. – Випуск XV, Т. 1. – Запоріжжя: Вид-во ЗДМУ. – 2006. – С. 9 – 15. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка статті).

6. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Вивчення методів ізолювання зопіклону з об’єктів біологічного походження // Вісник фармації. – 2006. – № 3 (47). – С. 26 – 30. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка статті).

7. Деклараційний патент на корисну модель (Україна) №14478, МПК 2006 G01N31/20. Спосіб якісного визначення зопіклону / В. В. Болотов,
   Л. Ю. Клименко. № u 2005 11210. Заявлено 28. 11. 2005. Опубл. 15. 05. 2006. Бюл. №5. – 6 с. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка опису патенту, обгрунтування формули корисної моделі).

8. Патент на винахід (Україна) №77879, МПК 2006 G01N31/20, G07C69/00. Хімічний реактив і спосіб якісного визначення речовин, що містять у своїй структурі естерну групу / В. В. Болотов, Л. Ю. Клименко, М. Є. Блажеєвський. № а 2005 05766. Заявлено 13. 06. 2005. Опубл. 15. 01. 2007.
   Бюл. №1. – 6 с. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка опису патенту, обгрунтування формули винаходу).

9. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Спектрофотометричне та екстракційно-фотометричне визначення зопіклону та 2-аміно-5-хлорпіридину // Матеріали науково-практичної конференції з міжнародною участю «Створення, виробництво, стандартизація, фармакоекономіка лікарських засобів та біологічно активних добавок». – Тернопіль: Укрмедкнига, 2004. – С. 258 – 260. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

10. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Применение тонкослойной хроматографии для обнаружения зопиклона и 2-амино-5-хлорпиридина // Матеріали всеукраїнського науково-практичного семінару «Перспективи створення в Україні лікарських препаратів різної спрямованості дії». 26 листопада 2004 р. – Харків: Вид-во НФаУ, 2004. – С. 291 – 295. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

11. Варик Ю. О., Клименко Л. Ю., Болотов В. В. Застосування реакції лужного пергідролізу складних ефірів для ідентифікації деяких лікарських препаратів // Тези доповідей міжвузівської студентської наукової конференції «Наукові основи створення лікарських засобів». 14 – 15 квітня 2005 р. – Харків: Вид-во НФаУ, 2005. – С. 32. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

12. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Розробка специфічних якісних реакцій для виявлення зопіклону // Матеріали VI Національного з’їзду фармацевтів України «Досягнення та перспективи розвитку фармацевтичної галузі України». 28 – 30 вересня 2005 р. – Харків: Вид-во НФаУ, 2005. – С. 141 – 142. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

13. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Вивчення екстракції зопіклону із водних розчинів органічними розчинниками // Матеріали VI Національного з’їзду фармацевтів України «Досягнення та перспективи розвитку фармацевтичної галузі України». 28 – 30 вересня 2005 р. – Харків: Вид-во НФаУ, 2005. – С. 142 – 144. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

14. Вивчення зопіклону за допомогою методу високоефективної рідинної хроматографії / В. В. Болотов, Л. Ю. Клименко, В. Ф. Першин, С. М. Кузнєцова, Ф. Х. Циба // Матеріали науково-практичної конференції з міжнародною участю «Стан, перспективи судово-токсикологічної служби та наукових досліджень». 9 – 10 листопада 2005 р. – Харків. – С. 25 – 26. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

15. Варик Ю. О., Клименко Л. Ю., Болотов В. В. Кислотний гідроліз в аналізі зопіклону // Тези доповідей міжвузівської студентської наукової конференції «Актуальні питання створення нових лікарських засобів». 27 квітня 2006 р. – Харків: Вид-во НФаУ, 2006. – С. 38. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

16. Шимко О. В., Клименко Л. Ю., Болотов В. В. Розробка якісних реакцій для виявлення зопіклону // Тези доповідей міжвузівської студентської наукової конференції «Актуальні питання створення нових лікарських засобів».
    27 квітня 2006 р. – Харків: Вид-во НФаУ, 2006. – С. 61. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

17. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Порівняльний аналіз методів ізолювання зопіклону із тканин печінки // Матеріали другої міжнародної конференції «Створення, виробництво, стандартизація та фармакологічні дослідження нових лікарських засобів та біологічно активних добавок». 12 – 13 жовтня 2006 р. – Харків: Вид-во НФаУ, 2006. – С. 80 – 82. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

18. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Розробка методик ізолювання зопіклону з крові // Матеріали другої міжнародної конференції «Створення, виробництво, стандартизація та фармакологічні дослідження нових лікарських засобів та біологічно активних добавок». 12 – 13 жовтня 2006 р. – Харків: Вид-во НФаУ, 2006. – С. 82 – 83. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).

19. Болотов В. В., Клименко Л. Ю. Хіміко-токсикологічний аналіз сечі на зопіклон // Матеріали другої міжнародної конференції «Створення, виробництво, стандартизація та фармакологічні дослідження нових лікарських засобів та біологічно активних добавок». 12 – 13 жовтня 2006 р. Харків: Вид-во НФаУ, 2006. – С. 83 – 84. (Особистий внесок здобувача – проведення експериментальних досліджень, аналіз та узагальнення отриманих даних, підготовка тез).