Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.07 – мікробіологія. – Інститут мікробіології і вірусології ім. Д. К. Заболотного НАН України, Київ, 2008.
Дисертація присвячена дослідженню ліпополісахаридів (ЛПС) Pragia fontium. З восьми штамів Pragia fontium20125, 29671, 28203, 28652, 97U116, 27480, 96U101, 97U124 виділено ЛПС, проведена хімічна ідентифікація, яка свідчить, що вони містять всі характерні для цих біополімерів компоненти. Макромолекулярна організація ЛПС у досліджуваних штамів відрізнялася і представлена S-, R- і SR-формами. Встановлена дивергенція властивостей ЛПС у порядку: ліпід А – О-ПС – олігосахарид кору. Найбільші розходження спостерігались в моносахаридному складі олігосахаридів кору (5 хемотипів), менші – О-специфічного полісахариду (4 хемотипи), в той час як жирнокислотний склад ліпідів А всіх восьми вивчених штамів P. fontium є аналогічним і представлений одним хемотипом.
Досліджувані ЛПС були токсичними і пірогенними. При модифікації ЛПС відбулася втрата серологічної активності. В імунохімічних дослідженнях ЛПС представників P. fontium в гомологічних системах проявляють активність антигену. В гетерологічних системах виявлена наявність перехресних серологічних реакцій у штамів (20125 і 29761), відповідно інші штами (28203, 28652, 97U116, 27480, 96U101, 97U124) відрізняються і відносяться до окремих серогруп. Показано, що ЛПС P. fontium приймають активну участь у адгезивних процесах. ЛПС отримані з штаму 20125 за різних температур вирощування відрізняються за хімічним складом та біологічними властивостями.
Дисертаційна робота містить наукові положення і результати щодо особливостей складу, молекулярної організації, а також деяких аспектів біологічної активності ЛПС 8 штамів нового виду ентеробактерій – P. fontium, а також науково-прикладні аспекти щодо створення і розробки на їх основі імуномодулюючих препаратів із заданими властивостями.
Головні наукові результати роботи викладено у наступних висновках:
Вперше виділено і хімічно охарактеризовано ЛПС 8 штамів P. fontium. Показано, що ЛПС 5 досліджуваних штамів (20125, 28203, 97U116, 27480, 97U124) є типовими для S-форм і представляють суміш S- та R- форм молекул ЛПС. Макромолекулярна організація ЛПС трьох інших штамів P. fontium відрізняється і, ймовірно, є R- (29671) або SR- (28652 та 96U101) формами ЛПС.
При порівняльному вивченні окремих структурних компонентів макромолекули ЛПС досліджуваних бактерій встановлена дивергенція їх властивостей у порядку: ліпід А – О-ПС – олігосахарид кору. Найбільші розходження спостерігаються в моносахаридному складі олігосахариду кору (5 хемотипів), менші – О-специфічного полісахариду (4 хемотипи), в той час як жирнокислотний склад ліпідів А всіх восьми вивчених штамів P. fontium є аналогічним і представлений одним хемотипом.
На основі О-антигенності ЛПС, досліджувані штами віднесені до 7 серогруп, що свідчить про імунохімічну гетерогенність виду P. fontium.
ЛПС P. fontium проявляють токсичність на три порядки нижчу, ніж ЛПС E. coli O55:B5, і пірогенність більшу, ніж “Пірогенал” – фармацевтичний препарат.
Вперше одержані модифіковані гідразоновими комплексами германію ЛПС P. fontium, яківтратили серологічну активность, але зберегли таку ендотоксичну властивість, як пірогенність.
ЛПС P. fontium знижували кількість адгезованих клітин E. coli на еритроцитах кроля шляхом конкуренції за зв’язування з їх поверхневими структурами, а також інгібували аглютинацію еритроцитів фітогемаглютиніном.
Вперше при різних температурах вирощування культур P. fontium отримані ЛПС, які характеризуються різним хімічним складом, пірогенністю, токсичністю і адгезивністю.
Публікації автора:
Варбанец Л.Д. Характеристика эндотоксического липополисахарида Pragia fontium DRL 27480 / Л.Д. Варбанец, В.В.Шубчинский, С.И. Похил // Современные проблемы токсикологии. – 2006. – №.2. – С.66-71. (Здобувачем накопичена біомаса досліджуваного штаму, виділений ЛПС, проведені аналізи по вивченню хімічного складу та ендотоксичних характеристик).
Шубчинский В.В. Перспектива использования липополисахаридов Pragia fontium DRL 27480 в разработке иммуномодулирующего препарата: тези доп. Міжнародної наукової конференції "Мікробні біотехнології" / В.В. Шубчинский – Одеса. 2006. – С.164.
Shubchynskyy V. Chemical characterization and serological activity of Pragia fontium lipopolysaccharides: 14th European Carbohydrate symposium / V. Shubchynskyy – Lubeck. 2007. – P.385.
Shubchynskyy V. Immunochemical studies of Pragia fontium lipopolysaccharides: the young scientists and students international scientific conference "Modern problems of microbiology and biotechnology" / V. Shubchynskyy– Odesa. 2007. – P. 34.
Шубчинський В.В. Хімічна характеристика структурних компонентів ліпополіцукридів бактеріїї Pragia fontium:Матеріали 2 міжнародної конференції молодих учених "Біологія: від молекули до біосфери" / В.В. Шубчинський – Харків. 2007. – С.391.
Шубчинський В.В. Хімічна характеристика і серологічна активність ліпополіцукридів Pragia fontium:Збірник тез3 міжнародної наукової конференції студентів та аспірантів "Молодь та поступ біології"/ В.В. Шубчинський – Львів. 2007. – С.106.
Shubchinskiy V.V. Characterisation and serological activity of Pragia fontium lipopolysaccharides: Abstracts 24-th International Carbohydrate Symposium / L.D. Varbanets, V.V. Shubchinskiy, S.I. Pohyl – Oslo, Norway. 2008. – F-P052.
