Анотація до роботи:

Луговськой Е.В. “Молекулярні механізми утворення фібрину та фібринолізу” – Монографія.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальністю 03.00.04 – біохімія. – Інститут біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України, Київ, 2004.

Дисертація присвячена пошуку раніше невідомих центрів полімеризації фібрину та створенню нової моделі формування тривимірної сітки фібрину – каркаса тромбу, а також одержанню моноклональних антитіл (монАТ), специфічних до головного продукту фібринолізу – D-димеру, для дослідження його антигенної структури та використання цих монАТ з метою кількісного визначення D-димеру в плазмі крові людини. Головна ідея даної роботи, яка сформувалася після аналізу літературних даних, полягає в тому, що кожна стадія полімеризації фібрину здійснюється не однією парою комплементарних центрів, як вважали раніше, а, як мінімум, двома парами. Для пошуку нових центрів полімеризації в Е- та D-доменах фібрин(оген)у були використані монАТ як молекулярні зонди. В NH₂-кінцевій частині Вb-ланцюга Е-домену фібриногену було виявлено невідомий раніше центр латеральної асоціації протофібрил фібрину, який для свого функціонування не вимагає відщеплення фібринопептиду В. В NH₂-кінцевій частині g-ланцюга D-домену фібрину було відкрито новий центр полімеризації фібрину, який необхідний для побудови протофібрил. Зроблено висновок, що побудова протофібрил фібрину здійснюється не тільки за рахунок міжмолекулярної взаємодії відомої пари центрів полімеризації “A”-“a”, як вважали раніше, але й за рахунок ще однієї пари комплементарних центрів. Одержано монАТ III-3b проти D-димеру людини, яке не має перехресної реакції з фібрин(оген)ом. Доведено, що епітопом для монАТ III-3b є невідома раніше антигенна детермінанта, яка формується в процесі гідролізу фібрину плазміном. Показано, що монАТ III-3b може бути використано з діагностичною метою для кількісного визначення D-димеру в плазмі крові людини.

1. Відкрито невідомі раніше центри полімеризації фібрину, які функціонують на різних етапах полімеризаційного процесу. Створено нову модель формування тривимірної сітки фібрину, яка є каркасом будь-якого тромбу. Виявлено невідому раніше антигенну детермінанту в D-димері фібрину, яка експонується в процесі фібринолізу.

2. Розроблено метод кількісного аналізу NH₂-кінцевих амінокислот фібриногену та фібрину, який дозволив ідентифікувати форми фібрину дезАА та дезААВВ.

3. Показано, що полімеризація фібрину дезАА здійснюється, головним чином, за рахунок електростатичних і водневих взаємодій, а при полімеризації фібрину дезААВВ додатково включаються й гідрофобні взаємодії.

4. Виявлено здатність до димеризації комплексів D-фрагмента з фрагментом Вb15-118 фібрину. Зроблено висновок про існування нековалентних взаємодій між D-доменами при побудові протофібрил фібрину.

5. Показано існування центру латеральної асоціації протофібрил фібрину в NH₂-кінцевій частині Вb-ланцюга фібриногену, який для свого функціонування не потребує відщеплення фібринопептиду В.

6. Встановлено існування невідомого раніше центру полімеризації фібрину, який необхідний для побудови протофібрил. Цей центр знаходиться у NH₂-кінцевій частині g-ланцюга D-домену фібрину. Зроблено висновок, що побудова протофібріл фібрину здійснюється не тільки за рахунок міжмолекулярної взаємодії відомої пари центрів "A"-"a", але й за рахунок, як мінімум, ще однієї пари комплементарних центрів.

7. Одержано монАТ (III-3b), яке специфічно реагує з D-димером фібрину людини без перехресної реакції з фібриногеном і фібрином. Епітоп для монАТ III-3b знаходиться у фрагменті Вb134-190 D-димеру, ймовірно, в Вb155-160. Таким чином, цей фрагмент є антигенною детермінантою, яка експонується в процесі гідролізу фібрину плазміном.

8. Показано, що монАТ III-3b може бути використане для кількісного визначення D-димеру в плазмі крові людини з діагностичною метою.

Публікації автора:

1. Луговской Э.В., Белицер В.А. Исследование механизма полимеризации фибрина с помощью нейтральных солей // Биохимия. – 1971. – 36, №1. – С. 129-137.

2. Луговськой Е.В., Дерзська С.Г., Гоголінська Г.К., Литвинова Л.М. Кількісне визначення NH₂-кінцевих амінокислот фібрину за методом Едмана з застосуванням тонко-шарової хроматографії // Укр. біохім. журн. – 1975. – 47, №6. – С. 760-768.

3. Позднякова Т.М., Луговской Э.В., Мусялковская А.А., Демченко А.П. Новые данные относительно структуры фибриногена. Обзор // Укр. биохим. журн. – 1975. – 47, №2. – С. 247-261.

4. Луговской Э.В., Гоголинская Г.К., Дерзская С.Г. Роль отщепления фибринопептида В в активации фибриногена тромбином // ДАН УРСР. – 1977. – №8. – С. 732-735.

5. Луговской Э.В., Белицер В.А., Гоголинская Г.К., Дерзская С.Г. Свойства двух форм мономерного фибрина, различающегося по степени активации тромбином. Характеристика последовательно образующихся активных центров // Биохимия. – 1978. – 43, №6. – С. 1045-1053.

6. Луговской Э.В., Белицер В.А., Гоголинская Г.К., Дерзская С.Г. Царюк Л.А. Свойства двух форм мономерного фибрина, различающегося по степени активации тромбином. ІІ. Отношение полимеризации этих форм фибрина к специфическим ингибиторам // Биохимия. – 1978. – 43, №7. – С. 1056-1061.

7. Зима В.Л., Луговской Э.В., Медведь Л.В., Гоголинская Г.К., Привалов П.Л. Структурная организация и локализация С-концевых участков a-цепей в молекуле фибриногена // ДАН СССР. – 1981. – 256, №2. – С. 480- 482.

8. Луговской Э.В. Первичная структура фибриногена и ее связь с конформацией и биологической функцией белка молекулы. Обзор // Укр. биохим. журн. – 1982. – 54, №5. – С. 578-594.

9. Belitser V.A., Lugovskoi E.V., Musjalkovskaja A.А., Gogolinskaja G.K. Quantitation of the inhibitory effect of fibrinogen and its degradation products on fibrin polymerization // Throm. Res. – 1982. – 27, N3. – Р. 261-269.

10. Угарова Т.П., Луговской Э.В., Горкун О.В., Дерзская С.Г. Исследование стабильности промежуточных полимеров фибрина, образующихся в системе фибриноген-фибрин // Укр. биохим. журн. – 1983. – 55, №3. – С. 254-260.

11. Луговской Э.В., Гоголинская Г.К., Дерзская С.Г. Исследование криокомплексов фибриногена и фибрина методом количественного анализа N-концевых аминокислот // Укр. биохим. журн. – 1983. – 55, №3. – С. 250-253.

12. Белицер В.А., Луговской Э.В., Угарова Т.П. Взаимодействие фибриногена с двумя формами фибрина, различающимися по степени активации тромбином // Биохимия. – 1985. – 50, №8. – С. 1336-1341.

13. Чудновец В.С., Луговской Э.В., Гоголинская Г.К., Дерзская С.Г., Назимов И.В., Комисаренко С.В. Выделение NH₂-концевых дисульфидных узлов фибриногена и фибрина человека и фрагментов полипептидных цепей, входящих в их состав // Доклады АН СССР. – 1991.– 317, №6. – С.1496-1499.

14. Луговской Э.В., Макогоненко Е.М., Чудновец В.С., Дерзская С.Г., Гоголинская Г.К., Колесникова И.Н., Буханевич А.М., Ситак И.Н., Ляшко Е.Д., Комисаренко С.В. Применение моноклональных антител для исследования процессов полимеризации фибрина // Доклады АН СССР. – 1991.– 318, №1. – С. 224-227.

15. Lugovskoi E.V., Makogonenko E.M., Chudnovets V.S., Derzskaya S.G., Gogolinsikaja G.K., Kolesnikova I.N., Bukhanevich A.M., Komisarenko S.V. The study of fibrin polymerization with monoclonal antibodies // Biomedical science. – 1991. – 2. – Р. 249-296.

16. Макогоненко Е.М., Луговской Э.В., Колесник Л.А., Кудинов С.А. О функциональном и диагностическом значеии А-, ВВ1-42, ВВ 15-42 пептидных фрагментов фибрин(оген)а // Укр. биохим. журн. – 1992.– 64, №4. – С. 78-82.

17. Луговской Э.В., Позднякова Т.М., Макогоненко Е.М., Степанова Л.Л., Дерзская С.Г., Гоголинская Г.К., Михаловская Л.И., Мороз. Е.Д., Комисаренко С.В. Комплексообразование димерного Д-фрагмента с NH₂-концевым дисульфидным узлом фибрина // ДAН України. – 1994. – №6.– С. 146-150.

18. Луговской Э.В., Макогоненко Е.М., Чудновец В.С., Дерзская С.Г., Гоголинская Г.К., Колесникова И.Н., Михаловская Л.И., Комисаренко С.В. Исследование полимеризации фибрина с помощью моноклональных антител 2d-2a и их Fab-фрагментов // Укр. биохим. журн. – 1995. – 67, №1. – С. 64-71.

19. Луговской Э.В., Макогоненко Е.М.,Чудновец В.С., Дерзская С.Г., Гоголинская Г.К., Михаловская Л.И., Комисаренко С.В. Фибриновый фрагмент b15-118. Ингибиторные и комплексообразующие свойства // Укр. биохим. журн. – 1995. – 67, №4. – С. 57-64.

20. Луговской Э.В., Позднякова Т.М., Sederholm-Willams, Комисаренко С.В. Структура и механизм функционирования центров полимеризации фибрина // Укр. биохим. журнал. – 1996. – 68, №6. – С. 3-17.

21. Lougovskoi E.V., Gogolinskaya G.K., Preparation of fibrin des-AA by thrombin // Укр. біохім. журн. – 1999. – 71, №4. – P.107-108.

22. Lugovskoi E.V., Komisarenko S.V. The use of monoclonal antibodies for studying the fibrin polymerization // Russian Journal of Bioorganik Chemistry. – 2000. –26, N12. – Р.791-798.

23. Луговской Э.В., Чудновец В.С., Гоголинская Г.К., Колесникова И.Н., Ляшко Е.Д., Литвинова Л.М., Матсуэда Г.Р., Комисаренко С.В. Влияние моноклональных антител к N-концевому фрагмента Вb-цепи фибриногена на полимеризацию фибрина // ДАН України. – 2001. – №10. – C. 190-194.

24. Луговской Э.В., Колесникова И.Н., Золотарева Э.Н., Чернишов В.И., Гриценко П.Г., Гоголинская Г.К., Веселовская Л.Д., Ляшко Е.Д., Литвинова Л.М., Костюченко Е.П., Петрова Ю.И., Комиссаренко С.В. Новый сайт полимеризации фибрина // ДАН України. – 2001. – №11. – С. 167-170.

25. Lugovskoy E.V., Zolotareva E.N., Gogolinskaya G.K., Gritsenko P.G., Moroz E.D., Komisarenko S.V. Polymerization Sites in the D-Domain of Human Fibrin(ogen) // Biochemistry. – 2002. – 67, N4. – P. 446-450.

26. Луговской Э.В., Гриценко П.Г., Скурский С.И., Комисаренко С.В. Роль ионов Са в полимеризации фибрина // Укр. биохим. журн. – 2002. – 74, №3. – С. 5-9.

27. Lugovskoi E.V., Gritsenko P.G., Kolesnikova I.N., Zolotareva E.N., Gogolinskaya G.K., Lyashko E.D., Litvinova L.M., Petrova J.I., Kostuchenko E.P., Komisarenko S.V. Neoantigenic determinant in the D-dimer fragment of fibrin // Reports of the National Academy of Sciences of Ukraine. – 2002. – N 2. – P. 188-191.

28. Lugovskoi E.V., Kolesnikova I.N., Gritsenko P.G., Zolotareva E.N., Gaffney P., Nieuwenhuizen W., Komisarenko S.V. A neoantigenic determinant in the D-dimer fragment of fibrin // Throm. Res. – 2002. – 107, N 3-4. – P. 151-156.

29. Луговской Э.В. Молекулярные механизмы образования фибрина и фибринолиза. Физико-химический и иммунохимический анализ (монография) // Наукова думка, Київ. – 2003 р. – 224 с.

30. Луговськой Е.В., Гриценко П.Г., Колеснікова І.М., Золотарьова Е.М., Чернишов В.І., Гоголінська Г.К., Ляшко Є.Д., Литвинова Л.М., Костюченко О.П., Петрова Ю.І., Комісаренко С.В. Новий центр полімеризації фібрину у його D-домені, який необхідний для побудови протофібрил // ДАН України. - 2004. - №1.– С.171-176.

31. Lugovskoy E.V., Gritsenko P.G., Kolesnikova I.N., Zolotareva E.N., Chernishov V.I., Nieuwenhuizen W., Komisarenko S.V. Two monoclonal antibodies to D-dimer – specific inhibitors of fibrin polymerization // Thromb. Res. – 2004. – 113, N 3-4, P. 251-259.