Анотація до роботи:

Довбуш А.В. Морфологічний стан і життєздатність аутодермотрансплантатів при різних методах консервування. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 14.03.09 – гістологія, цитологія, ембріологія. – Національний медичний університет ім О.О. Богомольця, Київ, 2002.

Дисертація присвячена вивченню морфологічного стану і життєздатності аутодермотрансплантатів при різних методах консервування. Гістологічні та морфометричні дослідження дозволили встановити три типи епідермоцитів у базальному шарі епідермісу шкіри в нормі, які відрізняються розмірами, ядерно-цитоплазматичним індексом, морфофункціональною організацією.

При гіпотермічному зберіганні шкіри у ранні терміни (1-3 доби) встановлені незначні структурні зміни епідермісу і дерми та велика кількість життєздатних епідермоцитів. Починаючи з 7 доби значно погіршується морфофункціональний стан структурних компонентів та знижується рівень життєздатності шкіри. Консервування аутошкіри в гліцерин-формаліновій та гліцерин-жовтковій сумішах дозволяє зберегти її відносно життєздатною протягом 7 діб.

Кріоконсервування шкіри з попередньо проведеною еквілібрацією в гліцерин-жовтковій суміші дозволяє зберегти структурні компоненти життєздатними протягом 30 діб, що дозволяє рекомендувати цей метод для довготривалого зберігання шкіри людини.

Kлючові слова: аутодермотрансплантати, морфологія, життєздатність, методи консервування.

1. У дисертації наведені теоретичне узагальнення і нове вирішення наукової задачі, що виявляються у встановленні закономірностей морфологічних змін аутодермотрансплантатів та визначенні їх життєздатності при різних умовах зберігання. За результатами проведених мікроскопічних, ультраструктурних, морфометричних досліджень та способом визначення життєздатності епідермоцитів встановлені терміни зберігання аутошкіри при різних методах її консервування.

2. Детальні гістологічні та морфометричні дослідження шкіри людини в нормі дозволили виділити три типи епітеліоцитів базального шару, які відрізняються розмірами, ядерно-цитоплазматичними співвідношеннями та морфофункціональною організацією. Крім двох загальновизнаних типів клітин, встановлені великі базальні епідермоцити з кератиносомами.

3. Гіпотермічне зберігання аутодермотрансплантатів (темпераратура 0 +4 ⁰С) призводить до реактивних морфофункціональних змін у ранні терміни досліду (1, 3 доби). У пізніші терміни (7, 14 доби) зберігання деструктивні зміни епідермісу та дерми поступово наростають та набувають незворотного характеру, що підтверджено збільшенням кількості вакуолізованих епідермоцитів, зниженням їх ядерно-цитоплазматичного співвідношення, руйнуванням органел та значним зменшенням кількості (18,5 % на 7 добу і 6,8 % на 14 добу) життєздатних клітин.

4. Структурна організація та життєздатність шкіри людини при консервуванні в гліцерин-формаліновій та гліцерин-жовтковій сумішах протягом 7 діб залишається малозміненою. У наступні терміни зберігання (14, 21 доби) поступово погіршується морфологічний стан епідермоцитів базального та остистого шарів, порушується структура базальної мембрани, відбувається значна деструкція клітинних і волокнистих компонентів дерми. Життєздатність епідермоцитів при зберіганні 14 діб і більше у цих сумішах значно знижується (26,2 % на 14 добу, 17,2 % на 21 добу при консервуванні гліцерин-формаліновим розчином; 39,5 % на 14 добу, 23,8 % на 21 добу при зберіганні в гліцерин-жовтковій суміші).

5. Морфологічні критерії життєздатності аутошкіри довели, що гліцерин-формаліновий розчин краще зберігає структурну організацію епідермісу та дерми внаслідок фіксуючої дії формаліну. Проте, спосіб визначення життєздатності епідермоцитів встановив достовірно нижчий рівень їх збереженості (в 1,50 рази на 14 добу і в 1,39 рази на 21 добу), ніж при консервуванні аутодермотрансплантатів у гліцерин-жовтковій суміші в однакові терміни досліду.

6. Кріоконсервування шкіри людини забезпечує високий ступінь збереженості структур епідермісу та дерми і життєздатність більшості (від 89,0 % на 14 добу і до 85,9 % на 30 добу) епідермоцитів протягом усього терміну спостережень. Цей метод можна рекомендувати для довготривалого зберігання аутодермотрансплантатів.

7. Отримані результати дослідження життєздатності аутошкіри при гіпотермічному зберіганні, консервуванні гліцерин-жовтковою сумішшю та при кріоконсервуванні можуть бути використані у практичній медицині, зокрема, комбустіології при необхідності проведення віддаленої у часі аутодермопластики.

Публікації автора:

1. Довбуш А.В. Ультраструктурна характеристика ксено- та аутодермотрансплантатів при низькотемпературному зберіганні та кріоконсервуванні // Науковий вісник Волинського державного університету. –2000. -№ 7. –С.80-82.

2. Довбуш А.В. Морфологічний стан та життєздатність аутодермотрансплантатів при гіпотермічному зберіганні в гліцерин-формаліновій та гліцерин-жовтковій сумішах // Вісник морфології. –2001. -№1. –С.67-69.

3. Довбуш А.В., Волков К.С. Засоби та методи закриття опікової рани // Наукові записки Тернопільського державного педагогічного університету. Серія: біологія. –2000. -№3(10). –С.88-91. (Довбуш А.В. провів пошук літературних джерел, зробив аналіз та узагальнення даних, особистий внесок становить 70 %. Волков К.С. узагальнив результати та сформулював висновки даного дослідження).

4. Бігуняк Т.В., Довбуш А.В., Волков К.С. Ультраструктура ксенодермотрансплантатів при використанні гліцерин-жовткової суміші для низькотемпературного зберігання та кріоконсервування // Буковинський медичний вісник. –2001. -Т.5. -№3-4. -С.16-17. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, інтерпретації даних особистий внесок становить 40 %. Бігуняк Т.В. виконувала експериментальну частину роботи та узагальнила результати, Волков К.С. сформулював висновки).

5. Довбуш А.В., Волков К.С. Рішення про видачу деклараційного патенту №2001031430 від 03.10.2001 року на винахід “Спосіб визначення життєздатності клітин”. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, описанні спостережень, їх аналізі, особистий внесок становить 70 %. Волков К.С. узагальнив результати та сформулював висновки даного дослідження).

6. Волков К.С., Якубишина Л.В., Андріїшин О.П., Довбуш А.В., Бігуняк Т.В., Сокольська В.О. Ультраструктурний стан епідермоцитів ксенотрансплантатів при консервуванні у гліцерин-жовтковій суміші // Здобутки клінічної та експериментальної медицини. -2001. -№ 6. -С.79-80. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, описанні спостережень, їх аналізі, особистий внесок становить 30 %).

7. Довбуш А., Котик А., Бігуняк Н., Швед А. Морфологія аутодермотрансплантатів при низькотемпературному зберіганні // Матер. 3 міжнар. медичного конгресу студентів і молодих вчених. –Тернопіль. -1999. –С.295. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, описанні спостережень, їх аналізі, особистий внесок становить 40 %).

8. Volkov K., Dovbush A., Bigunyak N., Falendysh L. Morphologic changes in liofilized xenodermografts // Paper presented during 18^th Congress of the Polish Society of Histochemistry and Cytochemistry. –Polish. –1999. –P.270. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, описанні спостережень, їх аналізі, особистий внесок становить 40 %).

9. Довбуш А.В., Волков К.С., Бигуняк В.В., Федонюк Л.Я. Морфология аутодермотрансплантатов в условиях длительной криоконсервации и низкотемпературном хранении // Матер. всерос. научн.-практич. конференции хирургов. –Россия. –1999. –С.233. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, описанні спостережень, їх аналізі, особистий внесок становить 70 %).

10. Довбуш А., Бігуняк Т., Котик В. Морфометричні дослідження епітеліоцитів базального шару епідермісу // Матер. 4 міжнар. конгресу студентів і мол. вчених. –Тернопіль, 2000. –С.294-295. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, описанні спостережень, їх аналізі, особистий внесок становить 40 %).

11. Довбуш А.В., Бігуняк Т.В., Котик В.О., Тураш І.Б. Ультраструктура аутодермотрансплантатів при консервуванні в гліцерин-жовтковій суміші // Матер. 5-й міжнар конгресу студентів та молодих вчених. -Тернопіль, 2001. –С.179. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, описанні спостережень, їх аналізі, особистий внесок становить 40 %).

12. Бігуняк Т.В., Волков К.С., Довбуш А.В. Субмікроскопічні зміни епідермоцитів кріоконсервованих ліофілізованих ксенотрансплантатів // Матер. наук. читань, присвячених 100-річчю від дня народження проф. Б.В. Альошина. –Харків. -2001. –С.5. (Довбуш А.В. брав участь у постановці експерименту, заборі матеріалу, описанні спостережень, їх аналізі, особистий внесок становить 40 %).