Анотація до роботи:

Александрова Н.О. Обмін та зв’язок поліамінів з функціонуванням ядерного фактору транскрипції NF-kB при пухлинах молочної залози. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 14.01.07 – онкологія. – Інститут експериментальної патології, онкології і радіобіології ім. Р.Є. Кавецького НАН України, Київ, 2005.

Дисертацію присвячено вивченню взаємозв’язку між метаболізмом поліамінів (ПА) і функціонуванням ядерного фактору транскрипції NF-kB.

Досліджено показники обміну ПА у хворих з новоутвореннями молочної залози.

За допомогою методів комп’ютерного моделювання теоретично обґрунтовано здатність ПА зв’язуватись зі субодиницею р50 ядерного фактору транскрипції NF-kB і зменшувати імовірність спонтанної дисоціації комплексу р50 – ДНК.

В модельних експериментах за допомогою біосенсорних та флуориметричних методів показано, що природні ПА (в інтервалі концентрацій 1 мкМ – 1 мМ), на відміну від синтетичного аналога ПА та інгібітора їх біосинтезу a-ДФМО, сприяють утворенню комплексу р50 зі специфічними послідовностями ДНК.

Показано, що в клітинах карциноми молочної залози мишей Са 755, карциносаркоми молочної залози щурів Уокер-256 та раку молочної залози людини MCF-7 виснаження ПА за допомогою a-ДФМО призводить до збільшення вмісту р50 і, в значно меншій мірі, р65 субодиниць фактору NF-kB в ядрах. При компенсації a-ДФМО-індукованого виснаження ПА шляхом додавання путресцину вплив деплеції ПА на вміст білків р50 та р65 нівелюється. Виявлено, що виснаження ПА призводить до зменшення вмісту білків – продуктів онкогенів c-myc i bcl-X_L, що свідчить про нездатність фактору NF-kB виконувати функцію транскрипції по відношенню до досліджуваних генів в умовах -ДФМО-індукованого виснаження ПА.

Робота присвячена дослідженню показників обміну поліамінів в пухлинах молочної залози і вивченню взаємозв’язку між метаболізмом поліамінів в пухлинах і функціонуванням фактора транскрипції NF-kB.

1. Показано, що вміст поліамінів і активність орнітиндекарбоксилази в пухлинній тканині молочної залози значно вищі, ніж в макроскопічно нормальній тканині.

2. Виявлена негативна кореляція між вмістом поліамінів у сечі хворих, прооперованих з приводу РМЗ та тривалістю їх життя; запропоновано нову кількісну характеристику (поліамінний показник), яка може бути застосована як додатковий фактор прогнозу перебігу захворювання у хворих на РМЗ.

3. Методами комп’ютерного моделювання та поверхневого плазмонного резонансу показано, що ПА здатні зв’язуватись з субодиницею р50 фактора транскрипції NF-kB; виявлено, що ПА сприяють утворенню комплексу NRE – NF-kB.

4. Виснаження поліамінів за допомогою a-дифторметилорнітину призводить до значного збільшення вмісту субодиниці р50 і помірного - субодиниці р65 фактора транскрипції NF-kB у ядрах клітин експериментальних пухлин молочної залози.

5. При компенсації a-ДФМО-індукованого виснаження ПА шляхом додавання путресцину, ефект деплеції ПА на NF-kB нівелюється.

6. Виснаження ПА за допомогою a-дифторметилорнітину в пухлинних клітинах молочної залози призводить до зниження вмісту білків-продуктів онкогенів с-myc і bcl-X_L. Найбільш імовірно це є наслідком зменшення транскрипційної активності ядерного фактору транскрипції NF-kB.

Публікації автора:

1. Залєток С.П., Бердинських Н.К., Лялюшко Н.М., Тарутінов В.І., Скляр С.Ю., Александрова Н.О. Показники метаболізму поліамінів в пухлинних тканинах та в сечі хворих з новоутвореннями молочної залози // Онкологія. – 2000. – Т.2, № 4. – С.250-252. (Автором визначено вміст поліамінів у підготовлених зразках спектрофлуориметричним методом, брала участь у обговоренні результатів та написанні статті).

2. Залєток С.П., Яковенко О.Я., Александрова Н.О., Голуб А.Г., Чехун В.Ф. Дослідження взаємодії поліамінів з ядерним фактором транскрипції NF-kappaB методами комп’ютерного моделювання // Український біохімічний журнал. – 2002. – Т.74, № 5. – С. 133-138. (Автор сформулював задачі для комп’ютерних програм, розрахував константи дисоціації комплексу р50*ДНК за відсутності та у присутності сперміну, брав участь у написанні статті).

3. Zaletok S., Aleхandrova N., Berdynskykh N., Ignatenko N., Gogol S., Orlovsky О., Tregubova N., Gerner E., Chekhun V. Role of polyamines in the function of nuclear transcription factor NF-kB in breast cancer cells // Experimental Oncology.– 2004. – Vol.26, N3. – P.221-225. (Автором виконано досліди методом ППР, приготовлено ядерні та клітинні екстракти для дослідів, підготовлено частину рукопису).

4. Александрова Н.О., Авілов С.В., Залєток С.П. Вплив сперміну та путресцину на зв’язування фактора транскрипції NF-kappaB зі специфічними послідовностями ДНК // Український біохімічний журнал. – 2004 .– Т.76, № 6. – С. 76-82. (Автор виконав всі досліди, брав участь в обговоренні результатів та підготував більшу частину рукопису статті).

5. Александрова Н.О., Залєток С.П., Скляр С.Ю., Тарутінов В.І. Застосування статистичного аналізу для визначення цінності поліамінного тесту в прогнозуванні тривалості життя хворих раком молочної залози // Вісник проблем біології і медицини. – 2004. – Вип. 4. – С. 108-114. (Автором проаналізовані дані про тривалість життя хворих, виконано математичний аналіз даних, підготовлено рукопис статті).

6. Александрова Н.О., Авілов С.В., Веревка С.В., Костюкевич К.В., Залєток С.П., Ширшов Ю.М. Спосіб модифікації поверхні золота для імобілізації біологічних молекул. Деклараційний патент на винахід № 48537 А, 15.08.2002, Бюл. № 8. (Автор виконав досліди методом ППР, брав участь у обговоренні результатів, підготував основну частину рукопису заявки на патент).

7. Залєток С.П., Бердинських Н.К., Лялюшко Н.М., Александрова Н.О., Скляр С.Ю., Носа П.П. Вміст поліамінів та активність орнітиндекарбоксилази в пухлинних тканинах та фізіологічних рідинах хворих на новоутворення молочної залози // Матеріали Х З’їзду онкологів України. – Ялта, 2001. – С.39.

8. Александрова Н.А., Яковенко А.Я., Залеток С.П. Исследование взаимодействия полиаминов с ядерным фактором транскрипции NF-kappaB методами компьютерного моделирования // Сборник тезисов 6-й Пущинской школы-конференции молодых ученых “Биология – наука 21-го века”. – Пущино, 2002. – C. 208.

9. Aleхandrova N.A., Zaletok S.P. Nuclear transcriptional factor NF-kappaB - DNA interaction: influence of polyamines // Abstr. 28^th Meeting of the Federation of European Biochemical Societies. – Стамбул, 2002 // The FEBS Journal. – 2002. – Vol. 269, № 1. – P. 108.

10. Александрова Н.О. Дослідження впливу поліамінів, їх аналогів та інгібіторів на зв’язування ядерного фактору транскрипції NF-kappaB з ДНК // Тези V конференції молодих онкологів України. – Київ, 2002. – С.3.

11. Александрова Н.А., Залеток С.П., Бердинских Н.К.,. Гоголь С.В, Чехун В.Ф. Исследование роли полиаминов в регуляции экспресии онкогенов фактором транскрипции NF-kappaB при опухолевом росте // Материалы III Съезда онкологов и радиологов СНГ. – Минск, 2004. – С.326.

12. Александрова Н.О., Залєток С.П. Вміст поліамінів у сечі хворих, прооперованих з приводу раку молочної залози, та їх виживання // Матеріали Міжнародної науково-практичної конференції „Сучасний стан і проблеми експериментальної та клінічної медицини”. – Тернопіль, 2004 // Медична хімія. – 2004. – Т.6, № 3. – С.156.