Анотація до роботи:

Коваль О. М. Субодиничний склад нікотинових холінорецепторів нейронів нижнього брижового ганглія морської свинки. – Рукопис.

Дисертація на здобуття вченого ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.13 – фізіологія людини та тварин. – Інститут фізіології ім. О. О. Богомольця НАН України, Київ, 2003.

Дисертація присвячена дослідженню субодиничного складу нікотинових холінорецепторів (НХР), які локалізуються на нейронах нижнього брижового ганглія (НБГ) морської свинки. Для цього використовували антитіла проти a₃-, a₄-, a₅-, a₇-, а також b₂- та b₄-субодиниць НХР.

Дослідження проведені із використанням методу внутрішньоклітинного відведення потенціалів від нейронів НБГ при подразненні прегангліонарного нерва (міжбрижового тракту). При цьому аналізували зміни амплітуди збуджуючих постсинаптичних потенціалів (ЗПСП), застосовуючи різні підтипи антитіл у якості специфічних блокаторів. Також був використаний метод імуногістохімічного забарвлення препаратів НБГ, де згадані антитіла виступали у якості імунореактивних міток.

На нейронах досліджуваного ганглія встановлено наявність нікотинових холінорецепторів, які містять у своєму складі a₃-, a₅-, та b₄-субодиниці. Також показано, що такі НХР відіграють головну роль у реалізації синаптичної передачі у нервовому шляху прегангліонарний нерв (міжбрижовий тракт) - нейрони НБГ. Нами не виявлено присутності a₄- та b₂- вмісних НХР на нейронах НБГ, та не показано їх участі у здійсненні синаптичної передачі.

На основі того, що блокатори a₇-вмісних НХР викликали збільшення амлітуди ЗПСП, зроблено припущення про позасинаптичну локалізацію a₇- вмісних НХР та їх модулюючий вплив на синаптичну передачу в НБГ морської свинки.

1. Застосування антитіл, специфічних до ₃-, ₅- та ₄-субодиниць нікотинових холінорецепторів (НХР) (амінокислотні залишки 181-192 та 183-192 для -субодиниць) селективно і ефективно ігібує синаптичні відповіді нейронів НБГ, викликані стимуляцією прегангліонарних волокон міжбрижового тракту. Це свідчить, що НХР, безпосередньо залучені у синаптичну передачу через досліджуваний ганглій, є ₃-, ₅- та ₄-вмісними.

2. Аплікація ₄- та ₂- специфічних антитіл не впливає на амплітуду збуджуючих постсинаптичних потенціалів (ЗПСП) у нейронах НБГ. Отже, НХР, які мають у своєму складі ₄- та ₂- субодиниці, не беруть участі у реалізації синаптичної передачі через НБГ морської свинки.

3. Аплікація ₇-специфічних антитіл або блокатора ₇-вмісних НХР метиллікаконітину (МЛА) призводила до збільшення амплітуди ЗПСП у нейронах НБГ. Отже, НХР, які містять у своєму складі ₇-субодиницю, спроможні опосередковано модулювати синоптичну передачу через НБГ.

4. Імуногістохімічне непряме забарвлювання препаратів НБГ показало, що 58,3, 63,4 та 59,8 % нейронів виявилися імунопозитивними до ₃-, ₅- та ₄-специфічних антитіл відповідно, тоді як ₄- та ₂- специфічні антитіла не спричинювали специфічного забарвлення мембран нейронів НБГ.

5. Чисельність популяцій та топографія ₃-, ₅- та ₄- імунореактивних нейронів були дуже близькими. Ці клітини переважно розташовувались у зонах відходження основних нервових трактів (міжбрижового, ободового та обох підчеревних нервів).

6. Співставлення наведених вище даних робить вірогідним припущення, що ₃-, ₅- та ₄- субодиниці можуть належати до складу одних і тих самих холінорецепторів, котрі відіграють основну роль у синаптичній передачі через НБГ.

7. Соми і відростки дрібних клітин НБГ демонстрували імунореактивність як до ₃-, ₅- і ₄-, так і до ₄-, ₇- та ₂- специфічних антитіл, однак місця переважного розташування дрібних гангліонарних клітин, імунопозитивних до різних підтипів антитіл, істотно відрізнялись. ₇-Імунореактивні дрібні клітини знаходились у особливо щільних контактах із незабарвленими сомами основних нейронів ганглія.

8. Результати визначення субодиничного складу НХР на нейронах НБГ морської свинки, отримані методом імуногістохімічного забарвлювання, досить добре узгоджуються із даними, отриманими у електрофізіологічних експериментах.

Перелік опублікованих праць здобувача за темою дисертації.

1. Коваль О.М. Участь a-субодиниць нікотинового холінорецептора в синаптичній передачі в нижньому брижовому ганглії морської свинки // Нейрофизиология / Neurophysiology – 2000. – Том 32, № 3. – С. 196 – 198.

2. Коваль О.М., Войтенко Л.П., Скок М.В., a-Субодиничний склад нікотинових холінорецепторів нейронів нижнього брижового ганглія морської свинки // Нейрофизиология/ Neurophysiology – 2003.– Том 35, №2. – С. 99-107.

3. Коваль О.М., Скок М.В., Скок В.І. a-Субодининий склад нікотинових холінорецепторів нейронів нижнього брижового ганглія морської свинки: електрофізіологічне дослідження // Нейрофизиология/ Neurophysiolgy.– 2003.– Том 35, № 1. – С. 9-19

Тези доповідей.

1. Koval O.M., Voitenko L.P., Skok V.I. The a7-subunit nicotnic acetylcholine receptors blockers facilitate synaptic transmission through guinea pig inferior mesenteric ganglion. The first Bogomoletz-Nencki Meeting, 2001, Аbstracts, P17.

2. Koval O.M., Voitenko L.P., Skok M.V. The alpha-subunit composition of nicotinic acetylcholine receptors in guinea pig inferior mesenteric ganglion: electrophysiological and imunohistochemical study. Second Bogomoletz-Nencki Meeting, 2002, Аbstracts, P17.

3. Коваль О.М., Войтенко Л.П. Участь a7- вмісних нікотинових холінорецепторів у синаптичній передачі нижнього брижового ганглія морської свинки Фізіол. Журн., 2002, т.48, № 2, с. 6-7.

4. Коваль О.М., Войтенко Л.П., Скок М.В. Альфа-субодиничний склад нікотинових холінорецепторів нейронів нижнього брижового ганглія морськї свинки. У кн. “Психофізіологічні та вісцеральні функції в нормі і патології” Київський національний університет імені Тараса Шевченка. Київ, 2002, с. 58.

5. Koval O.M., Voitenko L.P., Skok M.V., Skok V.I. b2- and b4- Subunit Composition of Nicotinic Acetylcholine Receptors in the Guinea Pig Inferior Mesenteric Ganglion: Immunohistochemical and Electrophysiologycal Studies.// Нейрофизиология/ Neurophysiology.- 2003.- Т.35, №3/4. - р.355.

Анотації.