Анотація до роботи:

Сілонов С.Б. Участь специфічних білків-акцепторів a-токоферолу в регуляції синтезу лейкотриєнів Рукопис

^{Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.04 – біохімія. Інститут біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України, Київ, 2008.}

^{Дисертаційну роботу присвячено вивченню впливу токоферолу на окисний метаболізм арахідонової кислоти по ліпоксигеназному шляху перетворення. Одержано нові дані відносно вивчення дії токоферолу на механізми перетворення арахідонової кислоти, пов’язані з обміном лейкотриєнів. Вивчено вплив Е-гіповітамінозу та його корекції на обмін ліпідів за вмістом токоферолу, холестеролу, загальних та індивідуальних фосфоліпідів, жирних кислот фосфоліпідної фракції печінки. Досліджено інтенсивність 5-ліпоксигеназного шляху перетворення арахідонової кислоти за вмістом арахідонової кислоти, сумарних та індивідуальних цистеїніл лейкотриєнів в крові і клітинах печінки щурів, а також мікросомальної глутатіон-S-трансферази за умов різного забезпечення токоферолом. Одержано комплекси токоферолу та токоферилхінону з токоферолзв’язуючими білками, виділеними з цитозолю печінки щурів. Досліджується роль токоферолзв’язуючих білків в процесах регуляції токоферолом утворення лейкотриєнів, зокрема вивчається вплив комплексів токоферол-токоферолзв’язуючі білки та токоферилхінон - токоферолзв’язуючі білки на активність ферментів синтезу лейкотриєнів 5-ліпоксигенази, лейкотриєн А}₄ ^{гідролази, лейкотриєн С}₄ ^{синтази, мікросомальної та цитозольної глутатіон-S-трансферази в дослідах in vitro.}

1. Виходячи з недостатньої з’ясованості молекулярних механізмів дії вітаміну Е на живі організми проведено дослідження впливу a-токоферолу та його метаболіту a-токоферилхінону на ліпоксигеназний шлях перетворення арахідонової кислоти. В умовах in vitro з’ясовано можливість взаємодії токоферолу та токоферилхінону з токоферолзв’язуючими білками на активність ферментів 5-ліпоксигеназного шляху перетворення арахідонової кислоти, та на моделі Е-гіповітамінозу в дослідах in vivo встановлено дію a-токоферолу на рівень лейкотрієнів.

2. За Е-гіповітамінозу в печінці щурів знижується вміст холестеролу і сумарних фосфоліпідів та вірогідно зростає рівень фосфатидихоліну, лізофосфатидил-холіну, фосфатидилетаноламіну, а також знижується вміст кардіоліпіну, змінюється вміст жирних кислот фосфоліпідної фракції печінки щурів: спостерігається підвищення вмісту стеаринової, зниження гексадодецилової, олеїнової та лінолевої, арахідонової кислот. При корекції a-токоферолом рівень холестеролу підвищується, відбувається зниження лізофосфатидилхоліну, фосфатидилетаноламіну та підвищення фосфатидилсерину. За цих умов вміст стеаринової та арахідонової кислот знаходиться в межах контролю, а олеїнової та лінолевої - виявляється дещо нижчим.

3. Е-гіповітаміноз призводить до зниження вмісту загальних цистеїніл лейкотриєнів (в печінці на 30%, крові на 10%), рівня індивідуальних лейкотриєнів в печінці (С₄ - на 11%, D₄ - на 12%, E₄ – не змінюється), а також активності глутатіон-S-трансферази мікросом на 68%. В крові має місце зниження кількості лейкотриєну С₄ на 11%, D₄ – на 23%, E₄ – на 12%. При корекції терапевтичною дозою токоферолу рівень сумарних та індивідуальних лейкотриєнів та активності глутатіон–S-трансферази перевищує контроль, що свідчить про участь a-токоферолу та його метаболіту a-токоферилхінону в 5-ліпоксигеназному шляху окисного метаболізму арахідонової кислоти та впливу їх на кінцевий спектр лейкотриєнів.

4. a-Токоферол in vitro вірогідно знижує активність арахідонат-5-ліпоксигенази, а токоферилхiнон не проявляє такого впливу на активність ферменту. Комплекси токоферолу і токоферилхінону з токоферол-зв’язуючими білками інгібують активність ферменту в 14 та 17 разів відповідно порівняно з контролем.

5. В дослідах in vitro з’ясовано, що за впливу токоферолу в 3,4 рази знижується активнiсть соєвої лінолеат-5-ліпоксигенази, при дії токоферилхінону на 36%, а за впливу комплексів токоферолу з токоферолзв’язуючими білками активність ферменту знижується в 15 разів порівняно з контролем.

6. -Токоферол та -токоферилхінон не впливають на активність лейкотриєн-А₄-гідролази, а комплекси -токоферолу та -токоферилхінону з токоферолзв’язуючими білками викликають зростання активності ферменту на 33 % та 29% відповідно.

7. a-Токоферол та його комплекс з токоферолзв’язуючими білками підвищує активність лейкотриєн-С₄-синтази на 15% та 33% відповідно, -токоферилхінон, як і його комплекс з токоферолзв’язуючими білками, не викликають змін активності цього ферменту in vitro.

8. При концентрації глутатіону 5 мкмоль -токоферол та -токоферилхінон викликають підвищення активності мікросомальної глутатіон-S-трансферази ( на 75% та 45% відповідно), а у комплексі з білками акцепторами підвищують активність ферменту при концентраціях глутатіону вищих 10 мкмоль на 28% та 31 % відповідно. Зростання рівня глутатіону викликає вірогідне зниження активності ферменту цитозольної фракції печінки щурів, яке спостерігається при дії кожного з досліджуваних чинників незалежно від їх природи.

9. a-Токоферол реалізує свою дію на активність ферментів 5-ліпоксигеназного шляху окисного метаболізму арахідонової кислоти за участю специфічних токоферолзв’язуючих білків. Доведено експериментально вплив -токоферолу, -токоферилхінону та їх комплексів з білками-акцепторами на перебіг ферментативних реакцій ПОЛ за ліпоксигеназного метаболізму арахідонової кислоти.

Список наукових праць, опублікованих за темою дисертації.

^{1. Пархомець В.П., Палівода О.М., Сілонов C.Б., Геблер І.О., Нартіков О.В., Донченко Г.В. Вплив комплексу токоферолу з білками зв’язуючими токоферол на активність лейкотрієн А}₄ ^{гідроксилази. // Вісник проблем біології і медицини.-1999. - №4.-С.39-42.}

^{2. Пархомець В.П., Сілонов С.Б., Донченко Г.В. Вплив a-токоферолу, токоферилхінону та їхніх комплексів з токоферолзв’язуючими білками на активність ферментів метаболізму арахідонової кислоти. // Укр.біохім.журн. - 2001. – 73, №1.- С. 43-47.}

^{3. Пархомець В.П., Донченко Г.В., Сілонов С.Б., Палівода О.М., Нартіков О.В., Геблер І.О. Вплив комплексів токоферолу та токоферилхінону з білками, що їх зв’язують, на активність лейкотрієн В}₄ ^{ліпоксигенази. //Укр.біохім.журн.- 2001. – 73, №6. - С. 50-55.}

^4. Сілонов С.Б., Донченко Г.В., Морозова Р.П. Особливості обміну лейкотриєнів в організмі щурів за умов Е-гіповітамінозу. // ^{Укр.біохім.журн.- 2008. – 80, №1. - С. 26-32.}

^5. Сілонов С.Б., Донченко Г.В., Морозова Р.П., ^{Нартіков О.В. Цистеїніл лейкотрієни печінки та крові щурів за умов різного забезпечення організму a-токоферолом //Лабораторна діагностика.- 2008. – №3 - С. 55-58.}

^{6. V.P. Parkhomets, O.M. Palivoda, S.B. Sylonov, G.V. Donchenko Tocopherol-binding proteins intensify action of tocopherol to enzymes of leucotrienes synthesis. // NATO Advanced Study Institute Co-sponsored by FEBS “Free Radicals, Oxidative Stress and Antioxidants. Pathological and Physiological Significance” May 24-June 4, 1997 Antalia, Turkey. P.136.}

^{7. G. V. Donchenko V.P. Parkhomets, O.M. Palivoda, S.B. Sylonov,A.V. Nartikov Tocopherol-binding proteins intensifity action of tocopherol to enzymes of leucotrienes synthesis. //17 Internationаl Congress of Biochemistry and Moleculer Biology in conjunction with 1997 Annual Meeting of theAmerican Society for Biochemistry and Moleculer Biology ” August 24-29, 1997. San Francisco, California //The FASEB journal ABSTRACTS. Volume11, №9. P A1344.}

^{8. Пархомець В.П., Палівода О.М., Сілонов C.Б., Донченко Г.В. Токоферол- зв’язуючі білки посилюють дію токоферолу на ферменти синтезу лейкотрієнів. // VI1 Український біохімічний з’їзд. Тези доп. – Київ, 1997. – Ч.3 - С.167.}

^{9. Пархомець В.П., Сілонов С.Б., Донченко Г.В. Вплив a-токоферолу, токо-ферилхінону та їх комплексів з токоферолзв’язуючими білками на активність ферментів метаболізму арахідонової кислоти. //Укр.біохім.журн. –2000.- 72, №6. - С 121.}

^{10. Силонов С.Б., Морозова Р.П., Донченко Г. В. Арахидоновая кислота и ферменты глутатионовой системы в печени крыс при Е гиповитаминозе. // VI Международная конференция “Биоантиоксидант”. Тезисы докл. – (16-19 апреля 2002 г. г. Москва).- Москва, 2002. - С. 524.}

^{11. Сілонов С.Б., Морозова Р.П. Дія комплексів токоферолу та токоферилхінону з білками акцепторами на активність трансфераз. // VIIІ Український біохімічний з’їзд. Тези доп. (1-3 жовтня 2002 р., м. Чернівці). - Укр.біохім.журн.-2002. - т. 74, №4а (додаток 1). – С. 79.}

12. ^{Сілонов С.Б., Морозова Р.П., Донченко Г.В. Дія токоферолу на метаболізм лейкотрієнів. // V Міжнародна Парнасівська конференція. (26-29 квітня 2002 р., м. Київ, Україна). Укр. біохім. журн. – 2002. - 77, №2. – С. 232.}

13. ^{Сілонов С.Б. Обмін лейкотрієнів за умов Е-гіповітамінозу у щурів. // ІХ Український біохімічний з’їзд. Тези доп. (24-27 жовтня 2006 р., м. Харків). Укр. біохім. журн. – 2006. –Т.2.- С.108.}

14. ^{Силонов C.Б., Донченко Г.В.} Кальций и уровень цистеинил лейкотриенов в организме крыс в условиях Е-гиповитаминоза // : Материалы Республиканской научной конференции, Сборник Молекулярная медицина и биохимическая фармакология - Гродно –2007. - С. 322-323.

15. ^{Сілонов C.Б., Донченко Г.В.} Вплив a- токоферолу на окисний метаболізм арахідонової кислоти //Національна науково-технічна конференція з міжнародною участю “Актуальні проблеми синтезу і створення нових біологічно активних сполук та фармацевтичних препаратів”. Тези доп.- (15-18 жовтня 2008 р., м. Львів). - Видавництво Національного університету “Львівська Політехніка”. - С. 212.

16. ^{Сілонов C.Б., Донченко Г.В.} Окисний метаболізм арахідонової кислоти в умовах різної забезпеченості організму щурів токоферолом. Тези конференції “Актуальні проблеми сучасної біохімії та клітинної біології» 30-31 жовтня 2008. – Дніпропетровськ. - С.73

.^{Анотація}