Анотація до роботи:

Коваль Л.М. Вплив нікотину на функції клітин В-лімфоцитарного походження.- Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.04 – Біохімія. – Інститут біохімії ім. О.В.Палладіна НАН України, Київ – 2006.

Дисертацію присвячено дослідженню молекулярних основ впливу нікотину на клітини В-лімфоцитарного походження. Встановлено, що нікотин впливає на базові життєві функції клітинних ліній мієломи X63-Ag8, гібридом SP-2/0 і 1D6 та лімфом DT40 і Ramos, діючи на експресовані ними нікотинові ацетилхолінові рецептори (нАХР). Клітини досліджених ліній експресують a4b2- і a7(b4)-вмісні нАХР, їх кількість і співвідношення відрізняються у клітин різного видового походження. Показано, що нікотин впливає на кількість нАХР, експресованих на поверхні досліджених клітин, здійснюючи їх ап- або даун-регуляцію, що залежить від функціонального стану клітин. Чутливість до дії нікотину залежить як від кількості нАХР, так і від їх функціональної активності, на яку зокрема впливають адгезивні контакти клітин. Нікотин стимулює проліферацію гібридом і опосередковано знижує продукцію ними антитіл, а також сприяє виживанню за несприятливих умов клітин пре-В лімфоми DT40. Механізм передачі проліферативного сигналу в клітинах досліджених ліній потребує відкриття іонного каналу, або конформаційних змін в молекулі рецептору. Отримані дані свідчать на користь про-проліферативної ролі нікотину для В-лімфоцитів, що може пояснити розвиток лімфопроліферативних захворювань і зниження кількості сироваткових імуноглобулінів у людей, що палять цигарки.

1. В результаті виконання дисертаційної роботи встановлено, що нікотин впливає на базові життєві функції клітинних ліній В-лімфоцитарного походження, діючи на експресовані ними нікотинові ацетилхолінові рецептори.

2. Клітини досліджених ліній: мієломи X63-Ag8, гібридом SP-2/0, 1D6 і лімфом DT40, Ramos, – експресують a4(b2) і a7(b4)-вмісні нАХР, причому кількість і спектр представлених на поверхні субтипів відрізняється у клітин різного видового походження.

3. За своїми властивостями нАХР клітин В-лімфоцитарних ліній подібні до нАХР нервових клітин: їх експресія є чутливою до нікотину, а десенситизація відбувається при підвищенні концентрації внутрішньоклітинного кальцію.

4. Нікотин впливає на кількість нАХР, експресованих на поверхні клітин В-лімфоцитарних ліній, здійснюючи їх ап- або даун-регуляцію, що залежить від функціонального стану клітин.

5. Чутливість клітин до дії нікотину залежить як від кількості нАХР, так і від їх функціональної активності, на яку зокрема впливають адгезивні контакти клітин.

6. Нікотин сприяє проліферації і виживанню за несприятливих умов клітин В-лімфоцитарних ліній і опосередковано впливає на продукцію антитіл гібридомою.

7. Механізм передачі проліферативного сигналу в клітинах досліджених ліній потребує відкриття іонного каналу або конформаційних змін в молекулі рецептору.

8. Отримані дані свідчать на користь про-проліферативної ролі нікотину для В-лімфоцитів, що може пояснити розвиток лімфопроліферативних захворювань і зниження кількості сироваткових імуноглобулінів у людей, що палять цигарки.

Публікації автора:

1. Skok M.V., Kalashnik E.N., Koval L.N., Tsetlin V.I., Utkin Y.N., Changeux J.-P., Grailhe R. Functional nicotinic acetylcholine receptors are expressed in B lymphocyte-derived cell lines // Mol. Pharmacol. – 2003. – Vol.64, № 4. – P.885–889. (Дисертант проводила дослідження по вивченню поверхневої експресії нАХР на клітинних лініях методом клітинного ІФА та впливу нікотину і специфічних токсинів на проліферацію та антитіло-продукцію клітинами гібридоми, приймала участь у обговоренні результатів).

2. Л.М.Коваль, С.І.Романюк, Д.В.Колибо, М.В.Скок, С.В.Комісаренко. Роль нікотину в регуляції проліферативних процесів в лімфоцитах // Укр. біохім. журн. – 2005. – т.77, № 2. – C.104–110. (Дисертант проводила дослідження по вивченню експресії субодиниць нАХР на клітинних лініях за впливу нікотину, різних функціональних станів та специфічного блокатору відкритого каналу бензогексонію, проводила експерименти з тваринами, приймала участь у обговоренні результатів).

3. Skok M.V., Koval L.M., Petrova Y.I., Lykhmus O.Y., Kolibo D.V., Romanyuk S.I., Yevdokimova N.Y., Komissarenko S.V. The effect of simulated microgravity on hybridoma cells // Acta Astronautica. – 2005. – Vol.56, № 8. – P.721–728. (Дисертант проводила підготовку усіх досліджуваних зразків контрольних та кліноротованих клітин, проводила дослідження з виживаємості та проліферації клітин, експресії поверхневих нАХР та їхньої чутливості до нікотину, приймала участь у обговоренні результатів).

4. M.V.Skok, O.Y.Lykhmus, L.M.Koval, D.V.Kolibo, S.I.Romanyuk. Structure and role of nicotinic acetylcholine receptors in lymphocytes studied with subunit-specific anti-peptide antibodies // Abstracts of the 4^th Parnas Conference. – Wroclaw, Poland. – 2002. – P.23.

5. М.В.Скок, О.Ю.Лихмус, Л.М.Коваль, Д.В.Колібо, С.І.Романюк. Будова і функції нікотинових ацетилхолінових рецепторів на клітинах імунної системи // Тези 8-го Українського біохімічного з’їзду. – Чернівці / Укр. біохім. журн., – 2002. – т.74, № 4б (додаток 2). – C.12–13.

6. Koval L.M., Kalashnik O.M., Skok M.V. Structure and role of nicotinic acetylcholine receptors in lymphocytes // Abstracts of the 6^th John Humphrey Advanced Summer Programme and Lecture Series in Immunology “Molecular Basis of the Immune Response”. – Pushchino. – 2002. – P.63.

7. Скок М.В., Петрова Ю.І., Колибо Д.В., Лихмус О.Ю., Коваль Л.М., Романюк С.І., Комісаренко С.В. Вплив імітованої мікрогравітації на клітини, що продукують антитіла // Сборник тезисов Третьей Украинской конференции по перспективным космическим исследованиям. – Кацивели, Крым. – 2003. – C.89.

8. Koval L., Romanyuk S., Komisarenko S., Skok M. Structure and functions of nicotinic acetylcholine receptors in transformed B lymphocytes // Abstracts of the First (Inagural) Ukrainian Congress for Cell Biology. – Lviv. – 2004. – P.285.

9. Komisarenko S.V., Koval L.M., Skok M.V. Structure and functions of nicotinic acetylcholine receptors expressed in B lymphocyte-derived cell lines // Abstracts of 29^th FEBS Meeting. – Warsaw, Poland / EJB. – Vol. 271, Suppl. 1. – 2004. – Р.123, (P3.8-16).

10. Skok M.V., Koval L.M., Romanyuk S.I., Kolibo D.V. Nicotinic acetylcholine receptors regulate proliferation of B lymphocytes // Abstracts of the 12^th International Congress of Immunology and 4^th Annual Conference of FOCIS. – Montreal, Canada / Chem. Invest. Med. J.– 2004. – Vol.27, № 4, Suppl. – Р.163C, (W50.51).

11. Koval L.M., Lykhmus E.Yu., Romanyuk S.I., Kolibo D.V., Komisarenko S.V., Skok M.V. Nicotinic acetylcholine receptors mediate the effect of nicotine on antibody-producing cells // Abstracts of the 5^th Parnas Conference. – Kiev / Ukr. Biochem. J. – 2005. – Vol.77, № 2. – P.59.

12. Коваль Л.М. Роль нікотину в регуляції функцій трансформованих В лімфоцитів // Програма та тези доповідей конференції-конкурсу робіт молодих учених, присвяченої 100-річчю з Дня народження Ростислава Всеволодовича Чаговця “Актуальні проблеми біохімії та біотехнології – 2004”. – Інститут біохімії ім.О.В.Палладіна НАН України. – 2004. – С.14.