Анотація до роботи:

Покотило О.С. Вплив поліненасичених жирних кислот родин -3 і -6 на ліпогенез і холестериногенез в організмі морських свинок і білих щурів за нормальних умов і при холестериновому навантаженні. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня доктора біологічних наук за спеціальністю 03.00.04 – біохімія. Інститут біології тварин УААН, Львів. – 2008.

Дисертація присвячена вивченню особливостей синтезу окремих класів ліпідів у різних органах і тканинах білих щурів та морських свинок при навантаженні холестеролом, впливу поліненасичених жирних кислот родин -6 і -3 на їх синтез з різних попередників, мічених радіоактивним вуглецем, ліпідного і жирнокислотного профілю крові досліджуваних тварин та розробці способу зменшення у них гіперхолестеринемії, в основі якого лежить додавання до раціону ПНЖК родини -3.

У результаті проведених досліджень встановлено збільшення вмісту холестеролу та триацилгліцеролів у плазмі крові білих щурів і морських свинок при навантаженні холестеролом та зниження інтенсивності синтезу жирних кислот, холестеролу й інших класів ліпідів у досліджуваних органах і тканинах тварин обох видів, особливо у білих щурів, при гіперхолестеринемії за використання як попередника жирних кислот [6-¹⁴С] глюкози і [2-¹⁴С] лізину. Виявлено підвищення інтенсивності синтезу ліпідів в органах і тканинах білих щурів і відсутність її зміни в органах і тканинах морських свинок з гіперхолестеринемією при використанні як попередника ліпідів [1-¹⁴С] пальмітинової кислоти. Встановлено, що соняшникова олія при додаванні її до раціону тварин обох видів з гіперхолестеринемією підвищує синтез жирних кислот і окремих класів ліпідів за використання як попередника [6-¹⁴С] глюкози і [2-¹⁴С] лізину та знижує їх синтез при використанні як попередника ліпідів [1-¹⁴С] пальмітинової кислоти. Додавання риб’ячого жиру до раціону тварин істотно не впливає на синтез жирних кислот і ліпідів у досліджуваних органах і тканинах морських свинок та інгібує його в органах і тканинах білих щурів при гіперхолестеринемії.

У дисертації наведено нові дані про особливості синтезу окремих класів ліпідів із різних попередників, мічених радіоактивним вуглецем, у ряді органів і тканин білих щурів та морських свинок, про ліпідний склад їх крові при навантаженні холестеролом, а також при додаванні до їх раціону соняшникової олії, як джерела ПНЖК родини -6, а також риб’ячого жиру окремо і разом із лляною олією, як джерела ПНЖК родини -3, про біологічно активну харчову добавку “Альфа+омега”, яка характеризується антихолестериногенною дією.

1. При згодовуванні білим щурам протягом 30 днів стандартного комбікорму з добавкою холестеролу в дозі 300 мг/кг маси тіла на добу концентрація холестеролу в плазмі крові у них була в 1,4 раза більша (р<0,01), ніж у плазмі крові тварин контрольної групи. У загальних ліпідах білих щурів із гіперхолестеринемією, порівняно з тваринами контрольної групи, виявлено достовірно меншу кількість арахідонової і більшу кількість олеїнової кислоти.

2. Додавання до раціону білих щурів протягом вказаного періоду разом із холестеролом соняшникової олії як джерела лінолевої кислоти, а також риб’ячого жиру як джерела ейкозапентаєнової і докозапентаєнової кислот у кількості 1 мл на тварину на добу призводить до достовірного зменшення концентрації холестеролу і триацилгліцеролів у плазмі крові. У загальних ліпідах плазми крові тварин із гіперхолестеринемією, до раціону яких додавали соняшникову олію, достовірно збільшується кількість лінолевої і зменшується кількість ейкозапентаєнової кислот. У загальних ліпідах плазми крові тварин, до раціону яких додавали риб’ячий жир, достовірно збільшується кількість докозагексаєнової і зменшується кількість арахідонової кислот.

3. Використання в раціоні білих щурів протягом вказаного періоду разом із холестеролом риб’ячого жиру та лляної олії, окремо й, особливо, разом, призводить до достовірного зниження концентрації загального холестеролу і -холестеролу та підвищення концентрації -холестеролу.

4. У синтезі жирних кислот і ліпідів у зрізах головного мозку, печінки, слизової тонкої кишки і жирової тканини білих щурів використовується [6-¹⁴С] глюкоза і [2-¹⁴С] лізин, а у синтезі усіх класів ліпідів – [1-¹⁴С] пальмітинова кислота. Загальна радіоактивність ліпідів, синтезованих зрізами досліджуваних органів і тканин білих щурів, при інкубації з [6-¹⁴С] глюкозою зменшується в ряді: головний мозок, жирова тканина, печінка, слизова тонкої кишки, при інкубації з [1-¹⁴С] пальмітиновою кислотою і [2-¹⁴С] лізином – у ряді: слизова тонкої кишки, жирова тканина, печінка, головний мозок.

5. Інтенсивність синтезу ліпідів при інкубації з [6-¹⁴С] глюкозою у зрізах головного мозку, печінки, слизової тонкої кишки і жирової тканини білих щурів при навантаженні холестеролом була нижча, відповідно, в 15,2; 8,1; 7,2 і 22,9 раза, при інкубації з [2-¹⁴С] лізином – у 1,3; 2,5; 1,1 і 9 разів, ніж при інкубації зрізів цих органів і тканин тварин контрольної групи. При інкубації зрізів головного мозку, печінки і жирової тканини білих щурів, до раціону яких додавали холестерол із [1-¹⁴С] пальмітиновою кислотою, інтенсивність синтезу ліпідів була, відповідно, в 1,5; 1,4 і 1,1 раза вища, ніж при інкубації зрізів вказаних органів і тканин тварин контрольної групи.

6. Інтенсивність синтезу ліпідів у головного мозку, печінці та слизовій тонкої кишки білих щурів, до раціону яких разом із холестеролом додавали соняшникову олію, при інкубації їх зрізів з [6-¹⁴С] глюкозою і [2-¹⁴С] лізином була достовірно вища (p<0,05), а при інкубації з [1-¹⁴С] пальмітиновою кислотою – нижча (p<0,05), ніж у тих же органах і тканинах тварин контрольної групи, до раціону яких додавали холестерол.

7. Інтенсивність синтезу ліпідів у всіх досліджуваних органах і тканинах білих щурів, до раціону яких разом із холестеролом додавали риб’ячий жир, при інкубації їх зрізів із [6-¹⁴С] глюкозою істотно не змінювалась (p<0,5), а при інкубації з [1-¹⁴С] пальмітиновою кислотою – була нижча від 3,9 до 9,6 раза, із [2-¹⁴С] лізином – від 1,1 до 2,7 раза, ніж у тварин контрольної групи.

8. Інтенсивність синтезу ліпідів у всіх досліджуваних органах і тканинах білих щурів, до раціону яких додавали разом із холестеролом соняшникову олію і риб’ячий жир, при інкубації їх зрізів з [2-¹⁴С] лізином була вища від 1,5 до 6,2 раза, при інкубації зрізів головного мозку, слизової тонкої кишки, жирової тканини з [6-¹⁴С] глюкозою – була вища від 5,5 до 15,6 раза, а при інкубації зрізів головного мозку, печінки, жирової тканини з [1-¹⁴С] пальмітиновою кислотою – нижча від 1,3 до 2,1 раза, ніж у вказаних органах і тканинах тварин контрольної групи з гіперхолестеринемією.

9. При згодовуванні морським свинкам протягом 30 днів стандартного раціону з добавкою холестеролу в дозі 300 мг/кг живої маси на добу концентрація холестеролу в плазмі крові у них була в 1,7 раза більша, ніж у плазмі крові тварин контрольної групи, вона достовірно знижувалася при додаванні до їх раціону риб’ячого жиру окремо і разом із лляною олією.

10. Інтенсивність синтезу ліпідів у досліджуваних органах і тканинах морських свинок при інкубації їх зрізів з [6-¹⁴С] глюкозою зменшується в ряді: жирова тканина, головний мозок, печінка, слизова тонкої кишки, при використанні [1-¹⁴С] пальмітинової кислоти – в ряді: головний мозок, печінка, жирова тканина, слизова тонкої кишки, при використанні [2-¹⁴С] лізину – в ряді: слизова тонкої кишки, жирова тканина, печінка, головний мозок.

11. Інтенсивність синтезу ліпідів у головному мозку, печінці, слизовій тонкої кишки і жировій тканині морських свинок при навантаженні холестеролом при інкубації їх зрізів з [6-¹⁴С] глюкозою була нижча від 2,3 до 3,2 раза, при інкубації з [2-¹⁴С] лізином – від 1,3 до 2,7 разів, а при інкубації з [1-¹⁴С] пальмітиновою кислотою – істотно не відрізнялась (p<0,5) від інтенсивності синтезу ліпідів у вказаних органах і тканинах тварин контрольної групи.

12. Інтенсивність синтезу ліпідів у всіх досліджуваних органах і тканинах, за винятком слизової тонкої кишки морських свинок, до раціону яких разом з холестеролом додавали соняшникову олію, при інкубації їх зрізів з [6-¹⁴С] глюкозою і [2-¹⁴С] лізином була достовірно вища (p<0,05), а при інкубації з [1-¹⁴С] пальмітиновою кислотою – нижча (p<0,05), ніж в органах і тканинах тварин контрольної групи, до раціону яких додавали холестерол.

13. Інтенсивність синтезу ліпідів у досліджуваних органах і тканинах морських свинок, до раціону яких разом із холестеролом додавали риб’ячий жир окремо і разом із лляною олією, при інкубації їх зрізів з [1-¹⁴С] пальмітиновою кислотою була достовірно нижча (p<0,05), а при інкубації з [6-¹⁴С] глюкозою і [2-¹⁴С] лізином – істотно не відрізнялась (p<0,5) від інтенсивності синтезу ліпідів у вказаних органах і тканинах тварин контрольної групи, до раціону яких додавали холестерол.

14. Додавання до раціону білих щурів із гіперхолестеринемією біологічно активної харчової добавки “Альфа+омега”, що містить риб’ячий жир, лляну олію, вітаміни А і Е, цинк і селен, призводить до достовірного зниження у плазмі крові рівня холестеролу з 0,73 до 0,47 ммоль/л (р<0,05).

РЕКОМЕНДАЦІЇ ЩОДО НАУКОВО-ПРАКТИЧНОГО ВИКОРИСТАННЯ ОДЕРЖАНИХ РЕЗУЛЬТАТІВ

Розроблено і запатентовано біологічно активну харчову добавку “Альфа+омега”, яка містить риб’ячий жир, лляну олію, вітаміни А і Е, цинк та селен, додавання якої до раціону білих щурів із гіперхолестеринемією знижує рівень холестеролу в крові. Проведено доклінічні дослідження на лабораторних тваринах, що дозволяють планувати її клінічне випробування у медичній практиці.

Публікації автора:

1. Покотило О.С. Вплив риб’ячого жиру і соняшникової олії при додаванні їх до раціону щурів з експериментальною гіперхолестеринемією на вміст холестерину і триацилгліцеролів у плазмі крові // Біологія тварин. – 2003. – Т. 5, № 12. – С. 118-121.

2. Покотило О.С. Вміст продуктів окиснення ліпідів у плазмі крові щурів за різного вмісту ПНЖК родини -3 і -6 у їх раціоні за умов гіперхолестеринемії // Наукові записки ТДПУ. Серія: Біологія. – 2003. – № 3-4. – С. 97-100.

3. Покотило О.С. Жирнокислотний склад ліпідів крові щурів при гіперхолестеринемії і його корекція -3 і -6 жирними кислотами // Здобутки експериментальної і клінічної медицини. – 2003. – № 2.– С. 40-44.

4. Покотило О.С., Фіра Л.С., Янович В.Г. Вплив -3 і -6 жирних кислот на енергетичний обмін у тканинах щурів в умовах in vitro // Наукові записки ТДПУ. Серія: Біологія. – 2004. – № 1. – С. 54-58.

(Дисертант провів експериментальні дослідження, статистичну обробку результатів, аналіз отриманих даних, написання і підготовка статті до друку).

5. Покотило О.С. Вплив поліненасичених жирних кислот родин -3 і -6 на синтез білків у тканинах щурів в умовах in vitro при гіперхолестеринемії // Мед. хімія. – 2004. – Т. 6. – № 2. – С. 74-76.

6. Покотило О.С., Янович В.Г. Синтез ліпідів в органах білих щурів in vitro при використанні як попередника [6-¹⁴С] глюкози при додаванні до їх раціону риб’ячого жиру // Наукові записки ТДПУ. Серія: Біологія. – 2004. – № 3-4. – С. 97-99.

7. Покотило О.С., Янович В.Г. Синтез ліпідів у тканинах білих щурів при гіперхолестеринемії // Біологія тварин. – 2004. – Т. 6 – № 1-2. – С. 252-255.

8. Покотило О.С. Доклінічні дослідження БАДу із -жирних кислот, цинку і селену як коректора порушень обміну речовин у тварин при гіперхолестеринемії // Мед. хімія. – 2005. – Т. 7. – № 1. – С. 29-32.

9. Покотило О.С. Синтез ліпідів in vitro у жировій тканині білих щурів при навантаженні холестерином з різних попередників, мічених радіоактивним вуглецем // Наукові записки ТДПУ. Серія: Біологія. – 2005. – № 1-2 (25). – С. 142-144.

10. Покотило О.С. Використання [2¹⁴-С] лізину в синтезі окремих класів ліпідів in vitro в тканинах білих щурів при навантаженні холестеролом // Мед. хімія. – 2005. – Т. 7. – № 4. – С. 66-68.

11. Покотило О.С. Вплив риб’ячого жиру при додаванні його до раціону білих щурів на використання [1-¹⁴C] пальмітинової кислоти в синтезі ліпідів в їх тканинах in vitro // Здобутки клінічної і експериментальної медицини. – 2005. – № 1. – С. 135-138.

12. Покотило О.С. Використання [1-¹⁴C] пальмітинової кислоти у синтезі окремих класів ліпідів in vitro у тканинах білих щурів при навантаженні холестеролом // Буковинський медичний вісник. – 2005. – Т. 9. – № 2. – С. 203-205.

13. Покотило О.С., Янович В.Г. Використання [2-¹⁴C] лізину в синтезі ліпідів у тканинах бiлих щурів in vitro // Наукові записки ТДПУ. Серія: Біологія. – 2006. – № 1 (28). – С. 99-101.

14. Покотило О.С., Янович В.Г. Вплив ПНЖК на окремі ланки метаболізму у морських свинок за умов холестеринового навантаження // Мед. хімія. – 2006.– Т. 9, № 2.– С. 87-90.

15. Покотило О.С., Янович В.Г. Синтез ліпідів in vitro у печінці морських свинок з гіперхолестеринемією при додаванні до їх раціону соняшникової олії і риб’ячого жиру // Біологія тварин. – 2006. – Т. 8. – № 1-2. – С. 186-190.

16. Покотило О.С. Використання [6-¹⁴C] глюкози в синтезі ліпідів у тканинах бiлих щурів in vitro // Вісник Чернігівського державного педагогічного університету. Серія: Біологічні науки. – 2006. – Т. 40. – № 1. – С. 74-76.

17. Покотило O.С. Особливості синтезу ліпідів in vitro у головному мозку морських свинок при гіперхолестеринемії // Наукові записки ТДПУ. Серія: Біологія. – 2006. – № 2 (29). – С. 112-115.

18. Покотило O.С. Особливості синтезу ліпідів з [6-¹⁴С] глюкози in vitro у жировій тканині морських свинок при гіперхолестеринемії та при підвищенні рівня поліненасичених жирних кислот родин -6 і -3 в їхньому раціоні // Таврический медико-биологический вестник. – 2006. – Т. 9. – № 4. – С. 167-169.

19. Покотило О.С. Вплив ПНЖК -6 і -3 на жирнокислотний склад крові морських свинок з гіперхолестеринемією // Наукові записки ТДПУ. Серія: Біологія. – 2006.– № 3-4 (30). – С. 131-135.

20. Покотило О.С. Вплив риб’ячого жиру, при додаванні його до раціону білих щурів з гіперхолестеринемією на використання [1-¹⁴С] пальмітинової кислоти в синтезі ліпідів в їх тканинах in vitro // Архив клинической и экспериментальной медицины. – 2006. – Т. 8. – № 3.– С. 88-91.

21. Покотило О.С. Синтез ліпідів in vitro у слизовій тонких кишок морських свинок з гіперхолестеринемією при додаванні до їхнього раціону соняшникової олії // Мед. хімія. – 2007. – Т. 11. – № 1 – С. 54-57.

22. Покотило O.С. Використання [2-¹⁴С] лізину та [6-¹⁴С] глюкози у синтезі ліпідів in vitro у тканинах морських свинок // Клінічна та експериментальна патологія. – 2007. – Т. 6.– № 1. – С. 146-148.

23. Покотило O.С., Янович В.Г. Синтез ліпідів in vitro у печінці морських свинок з гіперхолестеринемією при додаванні до їхнього раціону соняшникової олії // Біологічний вісник. – 2007. – Т. 11. – № 1. – С. 79-81.

24. Покотило O.С., Янович В.Г. Особливості синтезу ліпідів in vitro у головному мозку лабораторних тварин з гіперхолестеринемією при додаванні до їхнього раціону риб’ячого жиру // Львівський медичний часопис. – 2007. – Т. 13. – № 1-2. – С. 126-129.

25. Покотилo О.С. Активність АлАТ і АсАТ у крові білих щурів і морських свинок при додаванні до їх раціону поліненасичених жирних кислот -3 i -6 за умов холестеринового навантаження // Клінічна та експериментальна патологія. – 2007. – Т. 6. – № 2. – С. 99-102.

26. Покотило О.С. Синтез ліпідів у слизовій порожньої кишки морських свинок при гіперхолестеринемії in vitro // Науковий вісник Ужгородського університету. Серія: Біологія. – 2007. – № 21. – С. 232-234.

27. Покотило О.С., Янович В.Г. Ліпогенез і холестериногенез у печінці морських свинок при навантаженні холестеролом // Експериментальна та клінічна фізіологія і біохімія. – 2007. – № 4. – С. 29-33.

28. Покотило О.С., Янович В.Г. Вплив добавок льняної олії і риб’ячого жиру до раціону білих щурів з гіперхолестеринемією на вміст ліпідів і продуктів їх окиснення в крові // Біологія тварин. – 2007. – Т.9. - № 1-2. – С. 127-130.

29. Покотило О.С., Коваль М.І. Корекція ліпідного обміну і перекисного окиснення ліпідів при гіперхолестеринемії біологічно активною добавкою “Альфа+омега” // Науковий вісник Львівської національного університету ветеринарної медицини та біотехнологій ім. С.З.Гжицького. – 2007. – № 4. – С. 146-148.

(Дисертант провів експериментальні дослідження, статистичну обробку результатів, аналіз отриманих даних, написання і оформлення статті до друку).

30. Покотило О.С. Патент України №14794, Біологічно активна харчова добавка “Альфа+омега”, заявл. 23.10.2006 № 200611181 опубл. 10.06.2007, Офіційний бюлетень „Промислова власність”, бюл. № 8.

31. Покотило О.С. Вплив -3 жирних кислот на обмін ліпідів у крові щурів // Матеріали міжнародної конференції студентів і молодих вчених. – Тернопіль, – 2003. – С. 78.

32. Покотило О.С. Вплив різних джерел -3 і -6 жирних кислот на ліпідний профіль крові у щурів за умов гіперхолестеринемії // Матеріали науково-практичної конференції з міжнародною участю “Створення, виробництво, стандартизація, фармакоекономіка лікарських засобів та біологічно активних добавок”. – Тернопіль, Укрмедкнига, – 2004. – С. 401-404.

33. Покотило О.С. Вплив -3 і -6 жирних кислот на коагуляції крові у щурів за умов гіперхолестеринемії // Матеріали конференції молодих вчених і студентів СДМУ. – Суми, – 2004. - С. 60-61.

34. Покотило О.С., Тиш І.І., Трач П.М. Вплив -3 і -6 жирних кислот на енергетичний обмін у тканинах щурів в умовах in vitro за нормальних умов і при гіперхолестеринемії // Матеріали конференції студентів і молодих вчених. – Тернопіль, – 2004. – С. 125.

(Дисертант провів експериментальні дослідження, статистичну обробку результатів, аналіз отриманих даних, написання і підготовку тез до друку).

35. Покотило О.С., Козицька І.Я., Бітус А.В. Синтез ліпідів у тканинах білих щурів in vitro з [1-¹⁴С] пальмітинової кислоти при додаванні риб’ячого жиру і холестерину до їх раціону // Міжнародна конференція студентів і молодих вчених. – Тернопіль, – 2005. – С. 96.

(Дисертант провів експериментальні дослідження, статистичну обробку результатів, аналіз отриманих даних, написання і підготовку тез до друку).

36. Покотило О.С. Вміст продуктів окиснення ліпідів у плазмі крові морських свинок за різного вмісту ПНЖК родини -3 і -6 у їх раціоні за умов гіперхолестеринемії // Матеріали I-ї Міжнародної науково-практичної конференції “Науково-технічний прогрес і оптимізація технологічних процесів створення лікарських препаратів” – Тернопіль: Укрмедкнига, – 2006. – С. 204-205.

37. Осінчук О.В., Покотило О.С. Активність АлАТ і АсАТ у крові морських свинок за різного вмісту ліпідів у їх раціоні // Матеріали Міжнародного Конгресу студентів і молодих вчених. Тернопіль 12-13 травня 2006 р. – С. 56.

(Дисертант провів експериментальні дослідження, статистичну обробку результатів, аналіз отриманих даних, написання і оформлення тез до друку).

38. Покотило О.С., Янович В.Г. Вплив соняшникової олії і риб’ячого жиру на використання [2-¹⁴C] лізину у синтезі ліпідів тканинах білих щурів з гіперхолестеринемією // Тези конференції “Роль месенджерних систем у патогенезі патологічних процесів різної етіології” – Тернопіль, – Мед. хімія. – 2007. – Т. 11 –. № 4 – С. 98.