Анотація до роботи:

Козубенко Н.В. Зміна рівня нервовоспецифічних білків у мозку щурів під впливом експериментального соматогенного післяопераційного болю та фармакокорекції. – Рукопис.

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата біологічних наук за спеціальністю 03.00.04 – біохімія. – Інститут біохімії ім. О.В. Палладіна НАН України, Київ, 2005.

Робота присвячена вивченню впливу експериментального соматогенного післяопераційного болю на рівень окремих нервовоспецифічних білків у мозку щура.
У оперованих щурів стан гіпералгезії (перша доба після операції) супроводжується зниженням локомоторної та дослідницької активності. Одночасно у мозку цих тварин визначено підвищення вмісту мембранної та розчинної форм адгезивного білка NCAM, розчинної форми Са²⁺-звязуючого білку S-100 та філаментної форми білка проміжних філаментів астроцитів ГФКБ. Дані білки приймають активну участь у процесах синаптичної та нейрональної пластичності. Гепарансульфат- та гіалуронат-зв’язуюча здатність розчинних та цитоскелетних білків у результаті впливу післяопераційного болю зазнає незначних (до 20%) змін. Соматогенна післяопераційна гіпералгезія спричиняє збільшення вмісту розчинних форм NCAM та S-100 у сироватці крові оперованих щурів (на 40% та 177%, відповідно), що може свідчити про послаблення гематоенцефалічного бар’єру. Дія агоністу НМДА рецепторів глутамату викликає одно направлені зміни вмісту даних білків, як і гіпералгезія; на фоні оперативного втручання посилює вплив болю. Застосування неконкурентного антагоністу НМДА рецепторів МК-801 запобігає значним змінам нервовоспецифічних білків у мозку та сироватці крові щурів. На сьому добу після оперативного втручання відбувається наближення вмісту досліджуваних білків до показників норми. Отримані результати свідчать про активну участь даних білків у центральних механізмах передачі та обробки ноцицептивного сигналу за рахунок регуляції рівня Са²⁺, міжклітинної адгезії та форми астроцитів.

1. Гіпералгезія внаслідок оперативного втручання на задній кінцівці щура призводить до зміни рівня та співвідношення нейрональних молекул клітинної адгезії (NCAM), S-100b і ГФКБ астроцитів та загальної глікозаміноглікан-зв’язуючої здатності білків міжклітинного матриксу в мозку та сироватці крові.

2. Для першої доби після операції характерні:

- підвищення кількості мембранної та розчинної NCAM в середньому на 77% та 119%, відповідно; S-100b – на 86%, філаментного ГФКБ – на 17% та гіауронат-зв’язуючої здатності білків міжклітинного матриксу в середньому на 27%, при одночасному зниженні гепарансульфат-зв’язуючої здатності цитозольних та позаклітинних білків у довгастому мозку, що проводять ноцицептивні сигнали

- у таламусі/гіпоталамусі, аналізуючому відділі, збільшення мембранної NCAM в середньому на 43%, S-100b – на 52%, філаментної ГФКБ - на 43%, про одночасному зниження розчинної NCAM в середньому на 27%, гепарансульфат-зв’язучої здатності білків в середньому на 10-19% та нормальному рівні гіалуронат-зв’язуючої здатності білків.

- послаблення гематоенцефалічного бар’єру та поява розчинних форм NCAM, S-100b у сироватці при збереженні нормального рівня глікозидаз.

3. Для сьомої доби після оперативного втручання характерна тенденція наближення до нормального рівня досліджуваних білків, хоча відсотковий вміст ще залишається зміненим, на фоні нормалізації поведінкових реакцій щурів.

4. Вплив агоніста НМДА рецепторів глутамату підсилює ще більше ефект післяопераційної гіпералгезії.

5. Застосування неконкурентного антагоніста НМДА рецепторів МК-801 за 5 хв. до операції запобігає значним змінам вмісту нейроспецифічних білків у мозку щурів.

6. Нестероїдний протизапальний препарат Кетанов запобігає змінам вмісту Са²⁺-зв’язуючого білка S-100b в мозку оперованих щурів при одночасній модуляції зміни цитоскелету астроцитів та активації глікозаміноглікан-зв’язуючої здатності цитозольних та позаклітинних білків.

Публікації автора:

1. Козубенко Н.В., Кобеляцкий Ю.Ю., Ушакова Г.А. Содержание S-100b в мозге и сыворотке крови в условиях послеоперационной гипералгезии // Архив клинической и экспериментальной медицины, 2001, Т. 10, № 3. С. 301-304.

2. Козубенко Н.В., Кобеляцкий Ю.Ю., Ушакова Г.А. Изменение экспрессии белков астроглии в условиях послеоперационной гипералгезии // Нейрофизиология/ Neurophysiology. 2001. Т. 33, № 6. С. 393-398.

3. Ushakova G.A., Kozubenko N.V., Kobeliatsky Y.Y. Ketanov prevents changes in the level of calcium-binding protein S-100-beta under postoperation pain // Нейрофизиология/Neurophysiology. 2002. V. 34, № 2/3. P. 262-263.

4. Козубенко Н.В., Кобеляцкий Ю.Ю., Ушакова Г.А. Гликозаминогликан-связывающая способность белков мозга крыс в послеоперационный период // Нейрофизиология/Neurophysiology. 2004. Т. 36, № 1. С. 20-26

5. Ушакова Г.О., Козубенко Н.В., Кобеляцький Ю.Ю. Активність глікозидаз у сироватці крові та мозку щурів у післяопераційний період // Медична хімія. 2004. Т. 6, № 3. С. 91-94.

6. Kozubenko N., Ushakova G. N-CAM in the rat model of postoperative pain // FEBS Advanced Course «Glycoconjugate: Versatile structures - intriguing functions», Dubrovnik, Croatia, 24-30 September 2001.

7. Kozubenko N., Kobeliatsky Y., Ushakova G. Elevation of S-100b level in rat brain and blood serum under postoperative pain // J. Neurochem. 2001. V. 78 (Supl. 1) P. 16

8. Козубенко Н., Кобеляцкий Ю., Ушакова Г. Активность лизосомальных гликозидаз в сыворотке крови крыс при послеоперационной гипералгезии
   и фармакологической коррекции // Тези Міжнародної наукової конференції студентів
   і молодих вчених. 27-29 вересня 2001, Дніпропетровськ, Україна. С. 146-147.

9. Кобеляцкий Ю.Ю., Козубенко Н.В., Ушакова Г.А. Механизмы действия нестероидного противовоспалительного средства: препарат Кетанов // Архив клинической и экспериментальной медицины. 2001. Т.10, № 2, С. 164.

10. Kobeliatsky Y.Y., Kozubenko N.V., Ushakova G.A. Astroglial reaction to postoperative pain and glutamate and MK-801 effect // Procceding of the 10th World Congress on pain, August 17-22, 2002, San Diego, USA. IASP Press. P. 365.

11. Ushakova G.A., Kozubenko N.V., Kobeliatsky Y.Y. Glycosidase activity in the serum of rats under postoperative hyperalgesia and Ketanov application // Procceding of the 10th World Congress on pain, August 17-22, 2002, San Diego, USA. IASP Press. P. 153.

12. Ушакова Г.А., Козубенко Н.В., Кобеляцкий Ю.Ю. Влияние препарата «КЕТАНОВ» на уровень нейроспецифических белков в условиях послеоперационной гипералгезии // Укр. біохім. журн. 2002. Т. 74, № 4а. С. 185-186.

13. Kozubenko N.V., Ushakova G.A., Kobeliatsky Y.Y. Rat brain glial cell proteins change in concentration under postoperative pain // FENS-EFIC-IBRO European Pain School 2003 “Chronic Pain a Disease: Novel Scientific Concepts” Siena, Italy, 25-31 October 2003.

14. Kozubenko N.V., Ushakova G.A. NCAM as a neuronal plasticity marker under postoperative pain // 29th Meeting of FEBS, Warsaw, Poland, 26 June-1 July 2004. FEBS J., V. 271, Sup. 1, P. 155.